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抗體保存注意事項(xiàng)和保存條件
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抗體保存得當(dāng)與否,直接決定了抗體的活性和使用效果!如果抗體保存得當(dāng),大部分抗體活性都可以維持?jǐn)?shù)月甚至數(shù)年。以abcam 抗體保存方法為主,同樣也可以應(yīng)用到其他絕大部分的抗體產(chǎn)品! 1. 收到抗體后請(qǐng)務(wù)必在12000rpm 離心1-5min 后再打開(kāi)管蓋進(jìn)行分裝和保存!質(zhì)優(yōu)的抗體使用非常特殊的儲(chǔ)存管,只有在12000rpm 離心1-5min 才能將附著在管壁或蓋內(nèi)的抗體全部離心下來(lái)。即使是在10000rpm 離心也會(huì)導(dǎo)致離心不完全,導(dǎo)致出現(xiàn)抗體的量不足的現(xiàn)象! 2. 對(duì)于大部分抗體,比較合適的保存方式是分裝后保存在 -20 度 or -80 度對(duì)絕大多數(shù)抗體來(lái)說(shuō),保存在-20 度是完全足夠了。沒(méi)有任何證據(jù)顯示保存在-80度 會(huì)有更多的好處! (1) 分裝可以最大程度的降低反復(fù)凍融對(duì)抗體活性的損害,同時(shí)也降低了由于多次從同一管中吸取抗體造成的污染可能性。 (2) 分裝的量以一次實(shí)驗(yàn)用完為好,最少不能少于10ul 每份。因?yàn)榉盅b體積越小,抗體的濃度越可能會(huì)受到蒸發(fā)以及管壁吸附的影響 (3) 復(fù)融后的分裝抗體如果一次用不完,將剩余母液保存在4 度,避免再凍起來(lái)! (4) 抗體工作液應(yīng)該當(dāng)天配制當(dāng)天用完,在4 度 盡量不要超過(guò)1 天。 (5) 絕對(duì)避免將抗體保存在自動(dòng)除霜冰箱中。盡量將抗體保存在冰箱里層,而不是門上 3. 大部分抗體收到后4 度短暫保存1-2 周對(duì)抗體活性是沒(méi)有影響的。 如果抗體很快(1-2 周)會(huì)使用,推薦在4 度保存,這是為了避免反復(fù)凍融對(duì)抗體活性的損害。 如果要長(zhǎng)期保存則最好是在-20 度 or -80 度。最關(guān)鍵的一點(diǎn)是要根據(jù)說(shuō)明書推薦的方式來(lái)正確的保存抗體!但是,腹水形式的產(chǎn)品請(qǐng)?jiān)谑盏胶罅⒓磧銎饋?lái)!因?yàn)樵擃惍a(chǎn)品含有大量的蛋白酶,長(zhǎng)期在4 度保存會(huì)導(dǎo)致抗體的降解! 4. 大部分抗體的運(yùn)輸條件:一般的運(yùn)輸過(guò)程需要1-2 周的時(shí)間,所以是在4 度的條件下來(lái)完成的。4 度運(yùn)輸最主要的目的是為了避免反復(fù)凍融對(duì)抗體活性的損害(如果使用干冰運(yùn)輸,那么收到時(shí)抗體是凍起來(lái)的,為了分裝就需要解凍。這就多了一次凍融的過(guò)程)。所以運(yùn)輸過(guò)程中絕對(duì)避免干冰運(yùn)輸! 特殊抗體的保存條件: 1. 酶聯(lián)抗體:永遠(yuǎn)保存在4 度,避免凍起來(lái)。否則會(huì)導(dǎo)致酶活性的下降或者喪失 2. 偶聯(lián)抗體:所有偶聯(lián)抗體都是在棕色管中或使用錫箔紙避光保存。尤其是熒光抗體,對(duì)光極為敏感,因此在所有的實(shí)驗(yàn)階段也是要避光操作的! 3. IgG3 的同型對(duì)照:永遠(yuǎn)保存在4 度,避免凍起來(lái)。因?yàn)槿绻霈F(xiàn)凍融過(guò)程,該抗體非常容易形成多聚體 無(wú)論是保存還是運(yùn)輸,絕對(duì)避免反復(fù)凍融! 反復(fù)凍融會(huì)導(dǎo)致抗體變性,導(dǎo)致多聚體形成,從而降低抗體的結(jié)合能力! 公眾號(hào):畢合生物 畢合生物(www.bihebio.com)提供服務(wù)內(nèi)容:分子生物學(xué)、免疫, 重組蛋白及ELISA相關(guān)、活性小分子化合物、高端化學(xué)、材料化學(xué)、細(xì)胞資源庫(kù)與培養(yǎng)相關(guān)、生命科學(xué)、天然產(chǎn)物 |
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