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抗體保存注意事項和保存條件
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抗體保存得當與否,直接決定了抗體的活性和使用效果!如果抗體保存得當,大部分抗體活性都可以維持數月甚至數年。以abcam 抗體保存方法為主,同樣也可以應用到其他絕大部分的抗體產品! 1. 收到抗體后請務必在12000rpm 離心1-5min 后再打開管蓋進行分裝和保存!質優(yōu)的抗體使用非常特殊的儲存管,只有在12000rpm 離心1-5min 才能將附著在管壁或蓋內的抗體全部離心下來。即使是在10000rpm 離心也會導致離心不完全,導致出現抗體的量不足的現象! 2. 對于大部分抗體,比較合適的保存方式是分裝后保存在 -20 度 or -80 度對絕大多數抗體來說,保存在-20 度是完全足夠了。沒有任何證據顯示保存在-80度 會有更多的好處! (1) 分裝可以最大程度的降低反復凍融對抗體活性的損害,同時也降低了由于多次從同一管中吸取抗體造成的污染可能性。 (2) 分裝的量以一次實驗用完為好,最少不能少于10ul 每份。因為分裝體積越小,抗體的濃度越可能會受到蒸發(fā)以及管壁吸附的影響 (3) 復融后的分裝抗體如果一次用不完,將剩余母液保存在4 度,避免再凍起來! (4) 抗體工作液應該當天配制當天用完,在4 度 盡量不要超過1 天。 (5) 絕對避免將抗體保存在自動除霜冰箱中。盡量將抗體保存在冰箱里層,而不是門上 3. 大部分抗體收到后4 度短暫保存1-2 周對抗體活性是沒有影響的。 如果抗體很快(1-2 周)會使用,推薦在4 度保存,這是為了避免反復凍融對抗體活性的損害。 如果要長期保存則最好是在-20 度 or -80 度。最關鍵的一點是要根據說明書推薦的方式來正確的保存抗體!但是,腹水形式的產品請在收到后立即凍起來!因為該類產品含有大量的蛋白酶,長期在4 度保存會導致抗體的降解! 4. 大部分抗體的運輸條件:一般的運輸過程需要1-2 周的時間,所以是在4 度的條件下來完成的。4 度運輸最主要的目的是為了避免反復凍融對抗體活性的損害(如果使用干冰運輸,那么收到時抗體是凍起來的,為了分裝就需要解凍。這就多了一次凍融的過程)。所以運輸過程中絕對避免干冰運輸! 特殊抗體的保存條件: 1. 酶聯抗體:永遠保存在4 度,避免凍起來。否則會導致酶活性的下降或者喪失 2. 偶聯抗體:所有偶聯抗體都是在棕色管中或使用錫箔紙避光保存。尤其是熒光抗體,對光極為敏感,因此在所有的實驗階段也是要避光操作的! 3. IgG3 的同型對照:永遠保存在4 度,避免凍起來。因為如果出現凍融過程,該抗體非常容易形成多聚體 無論是保存還是運輸,絕對避免反復凍融! 反復凍融會導致抗體變性,導致多聚體形成,從而降低抗體的結合能力! 公眾號:畢合生物 畢合生物(www.bihebio.com)提供服務內容:分子生物學、免疫, 重組蛋白及ELISA相關、活性小分子化合物、高端化學、材料化學、細胞資源庫與培養(yǎng)相關、生命科學、天然產物 |
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