 |
 |
 |
 |
 |
 |
||
 |
 |
 |
 |
 |
| 1 | 1/1 | 返回列表 |
| 查看: 736 | 回復(fù): 0 | |||
[交流]
細(xì)胞鋪板實(shí)驗(yàn)操作技巧
|
|
做細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn)，細(xì)胞鋪板大概是常見的一個(gè)實(shí)驗(yàn)。但是有很多人不是很得要領(lǐng)，鋪得不是很均勻：要么中間密周圍稀，要么周圍密中間禿頂。怎么辦呢？以下來自豐壽技術(shù)人員詳細(xì)解析，請(qǐng)收好了！ 一般96孔板，每孔是加100微升細(xì)胞懸液，從孔的左邊靠近底部加入，加完半邊板后，將未加的細(xì)胞懸液混一下再繼續(xù)加剩余的半邊板子，都加完后蓋上蓋子，左手輕輕扶住板的左邊，右手輕輕敲擊板的右邊緣，注意把握力度（我一般輕巧敲三下），太強(qiáng)或次數(shù)太多會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞集中成堆，將板順時(shí)針旋轉(zhuǎn)（逆時(shí)針效果不好），依次敲擊剩余三個(gè)邊，靜置約5分鐘，放入37度培養(yǎng)箱。 6孔板、12孔板或24孔板，均可采用將個(gè)孔加入少量無血清培養(yǎng)基，晃動(dòng)浸潤(rùn)整個(gè)孔底，然后用移液槍吸至第二孔，同樣方法浸潤(rùn)孔底，其它孔一次類推，這樣整個(gè)孔底都是濕潤(rùn)的，細(xì)胞懸液會(huì)平鋪在整個(gè)孔底，加細(xì)胞懸液的時(shí)候可以避免加在中間，中間細(xì)胞多，而加在周邊晃勻后會(huì)出現(xiàn)周邊細(xì)胞多中間少的現(xiàn)象，細(xì)胞分散較均勻，注意加完細(xì)胞懸液后要放工作臺(tái)靜置一下。 細(xì)胞懸液加完后，將細(xì)胞培養(yǎng)板抬高，對(duì)著燈光，從底部往上看，看細(xì)胞有沒有抱團(tuán)。然后從底部敲擊，使之分散。如果實(shí)驗(yàn)室有平板振蕩器的話，建議用這個(gè)儀器稍振蕩一下，效果不錯(cuò)，振幅小，頻率高。 細(xì)胞要盡量打散，大部分呈單個(gè)狀態(tài)。離心后，要充分懸浮。還有轉(zhuǎn)移到六孔板后，需要晃動(dòng)，晃的時(shí)候不要讓細(xì)胞液轉(zhuǎn)圈，不然細(xì)胞就全被帶到中間去了，就會(huì)不均勻。 一瓶細(xì)胞長(zhǎng)滿后，正常處理，在培養(yǎng)瓶里吹勻，然后鋪6孔板，每孔2毫升，鋪完之后不用觀察直接用酒精棉擦拭，然后放到培養(yǎng)箱里，輕微的左右前后各三圈�；旧�24小時(shí)之后再觀察，每孔的細(xì)胞都會(huì)很均勻。 計(jì)算好所需要的全部液體量和細(xì)胞量，混勻后，加到六孔板里，六孔板按橫8字型晃，顯微鏡下觀察，如果不均勻，按上述方法再晃。如果細(xì)胞未計(jì)數(shù)直接種的話，在種六孔板的過程中，隨時(shí)晃一下混勻用的瓶子。 放在水平板面上先上下移動(dòng)，再左右移動(dòng)，每個(gè)方向5到6次，但關(guān)鍵的是搖晃后直接放入培養(yǎng)箱中，不要再做過多的運(yùn)動(dòng)，例如放到鏡下去看，否則很容易就又聚到中間去了。 公眾號(hào)：畢合生物 畢合生物（www.bihebio.com)提供服務(wù)內(nèi)容：分子生物學(xué)、免疫, 重組蛋白及ELISA相關(guān)、活性小分子化合物、高端化學(xué)、材料化學(xué)、細(xì)胞資源庫(kù)與培養(yǎng)相關(guān)、生命科學(xué)、天然產(chǎn)物 |
回復(fù)此樓» 猜你喜歡
材料與化工，291，求調(diào)劑
已經(jīng)有11人回復(fù)
-
求調(diào)劑 一志愿蘇州大學(xué)，0856化工323分 | 本科應(yīng)化 | 有專利/競(jìng)賽/科研助手經(jīng)歷 |
已經(jīng)有9人回復(fù)
-
085602化工求調(diào)劑
已經(jīng)有4人回復(fù)
-
0817一志愿蘇州大學(xué)280復(fù)試調(diào)劑
已經(jīng)有7人回復(fù)
-
083000環(huán)境科學(xué)與工程調(diào)劑
已經(jīng)有6人回復(fù)
-
307求調(diào)劑
已經(jīng)有3人回復(fù)
-
求材料讀博院校
已經(jīng)有9人回復(fù)
-
哈工大材料324求調(diào)劑
已經(jīng)有4人回復(fù)
-
材料調(diào)劑，307分
已經(jīng)有10人回復(fù)
-
0817化學(xué)工程319求調(diào)劑
已經(jīng)有9人回復(fù)
» 本主題相關(guān)商家推薦: (我也要在這里推廣)
相關(guān)版塊跳轉(zhuǎn)
我要訂閱樓主 Sh畢合生物 的主題更新
| 1 | 1/1 | 返回列表 |
| 最具人氣熱帖推薦 [查看全部] | 作者 | 回/看 | 最后發(fā)表 | |
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 0817化學(xué)工程319求調(diào)劑 +7 | lv945 2026-03-08 | 9/450 |
|
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 282分材料專業(yè)求調(diào)劑院校 +14 | 楓橋ZL 2026-03-09 | 20/1000 |
|
|
|
[考研]
一志愿天津大學(xué)材料與化工275求調(diào)劑
 10+4
|
穿只靴子 2026-03-07 | 15/750 |
|
|
|
[考研] 一志愿山東大學(xué)105500藥學(xué)專碩，總分302求調(diào)劑 +5 | 五維天空 2026-03-04 | 12/600 |
|
|
|
[考研] 考研一志愿長(zhǎng)安大學(xué)材料與化工309分請(qǐng)求調(diào)劑 +6 | dtdxzxx 2026-03-06 | 8/400 |
|
|
|
[考研] 材料調(diào)劑 +4 | xxxcm 2026-03-08 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 0703化學(xué)求調(diào)劑，總分309分，一志愿華南師范 +3 | 花與葉@ 2026-03-08 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)專業(yè)26考研求調(diào)劑 +3 | 琪ya 2026-03-03 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 考研求調(diào)劑，工科，總分304 +4 | 矮子不想長(zhǎng)高了 2026-03-08 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 材料工程307，求調(diào)劑 +4 | 我要燃燒你的夢(mèng) 2026-03-08 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 269求調(diào)劑 +3 | 朔朔話 2026-03-08 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 288求調(diào)劑 +5 | 好好- 2026-03-07 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 083000，總分284，求調(diào)劑 +5 | 徐yr 2026-03-04 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 287求調(diào)劑 +3 | 看看我. 2026-03-05 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 材料與化工354調(diào)劑 +4 | Lucy-xiao 2026-03-06 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 材料考研339求調(diào)劑 +3 | Karry*^_^* 2026-03-04 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 334求調(diào)劑 +3 | Trying] 2026-03-03 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 322分 085600求調(diào)劑，有互聯(lián)網(wǎng)+國(guó)金及主持省級(jí)大創(chuàng)經(jīng)歷 +6 | 熊境喆 2026-03-04 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 0703化學(xué) 一志愿東北大學(xué) 279分求調(diào)劑 +4 | 聶樂平 2026-03-03 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 085600 材料與化工 298 +14 | 小西笑嘻嘻 2026-03-03 | 14/700 |
|