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小木蟲論壇-學術科研互動平臺 » 生物醫(yī)藥區(qū) » 生物科學 » 細胞科學 » 影響細胞轉染的因素
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影響細胞轉染的因素
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1、血清：血清影響復合物的形成，降低轉染效率。 陽離子脂質體和DNA的最佳量在使用血清時會有所不同，因此想在轉染培養(yǎng)基中加入血清時要進行條件優(yōu)化。大部分細胞可以在無血清培養(yǎng)基中幾個小時內保持健康。 2、抗生素：比如青霉素和鏈霉素，是影響轉染的培養(yǎng)基添加物。這些抗生素一般對于真核細胞無毒，但陽離子脂質體試劑增加了細胞的通透性，使抗生素可以進入細胞。這降低了細胞的活性，導致轉染效率低。 3、細胞代數(shù)：轉染前細胞最好經過1-2次傳代保證細胞生長旺盛容易轉染，注意貼壁細胞一旦長滿就不好轉染。 4、細胞鋪板密度：一般轉染時，貼壁細胞密度為70%-90%，懸浮細胞密度為2*10^6--4*10^6 細胞/ml 時效果較好。確保轉染時細胞沒有長滿或處于靜止期。鋪板細胞數(shù)目的增加可以增加轉染活性和細胞產量。 5、DNA質量：DNA質量對轉染效率影響非常大。一般的轉染技術基于電荷吸引原理，如果DNA不純，如帶少量的鹽離子，蛋白，代謝物污染都會顯著影響轉染復合物的有效形成和轉染的進行。 |
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