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科研小努力新蟲 (小有名氣)
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[交流]
PCR新手必看
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最近學(xué)習(xí)定量PCR和數(shù)字PCR,然后就遇到各種PCR技術(shù),PCR、qPCR、RT-PCR、RT-qPCR、Real-Time PCR和ddPCR,有幾個長得好像,怎么區(qū)分呢?今天一舉搞定它。 01、普通PCR PCR是普通PCR,以雙鏈DNA為模板,以dNTP為底物,特異性地擴增雙鏈DNA。然后采用瓊脂糖凝膠電泳對產(chǎn)物進行檢測,只能做定性分析。 02、實時熒光定量PCR qPCR和Real-time PCR是實時熒光定量PCR,以cDNA為模板,以dNTP為底物,對擴增出的DNA進行定量分析。實時熒光定量PCR常用的方法:水解探針法和熒光染料法。 03、逆轉(zhuǎn)錄PCR RT-PCR 是逆轉(zhuǎn)錄PCR,采用 Oligo(dT) 或隨機引物利用逆轉(zhuǎn)錄酶反轉(zhuǎn)錄成 cDNA,再以 cDNA 為模板進行 PCR 擴增,結(jié)果只能定性,不能定量。 04、實時熒光定量逆轉(zhuǎn)錄PCR RT-qPCR是實時熒光定量逆轉(zhuǎn)錄PCR,是qPCR+RT-PCR的組合,將總RNA或mRNA逆轉(zhuǎn)錄成cDNA后再作為模板,以dNTP為底物,進行qPCR的定量分析。 05、數(shù)字PCR dPCR是數(shù)字PCR即三代PCR,是一種能夠?qū)崿F(xiàn)核酸絕對定量的精準檢測技術(shù),基于泊松分布原理將核酸樣品分配到大量獨立、平行的微反應(yīng)單元(納升級)中,使每個反應(yīng)室中平均只有一個拷貝或者沒有目標DNA分子,然后加入熒光信號進行擴增,從而實現(xiàn)靶標核酸分子的絕對計數(shù),提高檢測靈敏度和準確度。 Q 各種PCR的全稱 A: ① 聚合酶鏈式反應(yīng)(Polymerase Chain Reaction,PCR) ②實時熒光定量PCR(Quantitative Real-time PCR,qPCR) ③ 逆轉(zhuǎn)錄PCR(RT-PCR) ④實時熒光定量逆轉(zhuǎn)錄PCR(Real-time RT-PCR,RT-qPCR) 數(shù)字PCR(Digital PCR,Dig-PCR,dPCR) |
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材料325求調(diào)劑
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mariusuki 2026-03-02 | 10/500 |
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[考博] 26申博 求博導(dǎo) +3 | 愛讀書的小帥 2026-02-28 | 5/250 |
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[考研] 江蘇省農(nóng)科院招調(diào)劑1名 +5 | Qwertyuop 2026-03-01 | 5/250 |
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[考研] 一志愿東北大學(xué)化學(xué)314分求調(diào)劑 +5 | lr1212.. 2026-03-02 | 5/250 |
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[考研] 268求調(diào)劑 +10 | 簡單點0 2026-03-02 | 14/700 |
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[考研] 材料學(xué)碩318求調(diào)劑 +15 | February_Feb 2026-03-01 | 17/850 |
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[考研] 化學(xué)0703求調(diào)劑 學(xué)碩 理/工科均可 總分279 +3 | 1一11 2026-03-03 | 5/250 |
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[考研] 調(diào)劑 +5 | 13853210211 2026-03-02 | 7/350 |
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[論文投稿]
通訊作者寫誰,問題是你意想不到的問題
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阿爾法啊 2026-03-01 | 3/150 |
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[考研] 考研復(fù)試調(diào)劑,過國家線的同學(xué)都可報名 +7 | 黑!在干嘛 2026-02-28 | 8/400 |
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[考研] 【2026 碩士調(diào)劑】課題組 招收調(diào)劑生 +3 | 考研版棒棒 2026-03-02 | 5/250 |
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[考研] 321求調(diào)劑一志愿東北林業(yè)大學(xué)材料與化工英二數(shù)二 +5 | 蟲蟲蟲蟲蟲7 2026-03-01 | 9/450 |
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[考研] 0856材料調(diào)劑 +5 | 沿岸有貝殼OUC 2026-03-02 | 5/250 |
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[考研] 化工專碩342,一志愿大連理工大學(xué),求調(diào)劑 +6 | kyf化工 2026-02-28 | 7/350 |
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[考研] 材料調(diào)劑 +6 | 愛擦汗的可樂冰 2026-02-28 | 7/350 |
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[考研] 調(diào)劑 +3 | 13853210211 2026-03-02 | 4/200 |
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[考研] 279求調(diào)劑 +3 | dua1 2026-03-01 | 4/200 |
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[考研] 272求調(diào)劑 +6 | 田智友 2026-02-28 | 6/300 |
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[考研] 328求調(diào)劑 +3 | aaadim 2026-03-01 | 5/250 |
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[考研] 304求調(diào)劑 +6 | 曼殊2266 2026-02-28 | 7/350 |
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