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科研小努力新蟲 (小有名氣)
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抑菌圈試驗(yàn)操作步驟及注意事項(xiàng)
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試驗(yàn)過程 1、用接種環(huán)挑取各試管斜面的菌種于帶玻璃珠的無菌水中,用手振蕩數(shù)分鐘使孢子分散,過濾后制成混合孢子懸液。 2、用無菌吸管(或針筒)向各培養(yǎng)皿中注入一定濃度的混合孢子懸浮液0.5mL。 3、向各培養(yǎng)皿內(nèi)注入15Ml~20ml的熔化狀瓊脂培養(yǎng)基(約45℃),將菌液與培養(yǎng)基混合均勻,待其冷卻。 4、用鑷子將圓片濾紙?jiān)诓煌瑵舛鹊姆烂箘┲薪䴘n片刻,取出置于帶菌培養(yǎng)基平板的中央,蓋上蓋子 5、置適宜溫度下,培養(yǎng)2~3d,觀察濾紙片圓片周圍抑菌圈的有無及大小。 注意事項(xiàng) 1、所有的操作用具和材料都要事先做滅菌處理,操作必須在無菌室(或無菌箱)內(nèi)于火焰旁進(jìn)行。 2、霉菌、細(xì)菌、酵母菌等各種微生物都必須分別配置混合菌液,即這里指的混合菌液是霉菌或酵母菌等諸種菌的分別混合液,并非霉菌、細(xì)菌和酵母菌的混合液。 3、混合菌液的濃度一般為106~108cfu/mL. 4、倒入培養(yǎng)皿的瓊脂培養(yǎng)基溫度不能太高(一般為45℃左右),否則會(huì)引起微生物死亡。也不能太低,因?yàn)榄傊瑫?huì)很快凝結(jié),以致攪拌不均勻,影響試驗(yàn)結(jié)果。 5、各種微生物的最適生長(zhǎng)溫度不同(例如霉菌一般為25~30℃,細(xì)菌一般為32~37℃等),恒溫培養(yǎng)時(shí)宜分開放置。 |
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