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抑菌圈試驗操作步驟及注意事項
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試驗過程 1、用接種環(huán)挑取各試管斜面的菌種于帶玻璃珠的無菌水中，用手振蕩數(shù)分鐘使孢子分散，過濾后制成混合孢子懸液。 2、用無菌吸管（或針筒）向各培養(yǎng)皿中注入一定濃度的混合孢子懸浮液0.5mL。 3、向各培養(yǎng)皿內注入15Ml~20ml的熔化狀瓊脂培養(yǎng)基（約45℃），將菌液與培養(yǎng)基混合均勻，待其冷卻。 4、用鑷子將圓片濾紙在不同濃度的防霉劑中浸漬片刻，取出置于帶菌培養(yǎng)基平板的中央，蓋上蓋子 5、置適宜溫度下，培養(yǎng)2~3d，觀察濾紙片圓片周圍抑菌圈的有無及大小。 注意事項 1、所有的操作用具和材料都要事先做滅菌處理，操作必須在無菌室（或無菌箱）內于火焰旁進行。 2、霉菌、細菌、酵母菌等各種微生物都必須分別配置混合菌液，即這里指的混合菌液是霉菌或酵母菌等諸種菌的分別混合液，并非霉菌、細菌和酵母菌的混合液。 3、混合菌液的濃度一般為106~108cfu/mL. 4、倒入培養(yǎng)皿的瓊脂培養(yǎng)基溫度不能太高（一般為45℃左右），否則會引起微生物死亡。也不能太低，因為瓊脂會很快凝結，以致攪拌不均勻，影響試驗結果。 5、各種微生物的最適生長溫度不同（例如霉菌一般為25~30℃，細菌一般為32~37℃等），恒溫培養(yǎng)時宜分開放置。 |
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