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實(shí)驗(yàn)分析方法--硅膠基質(zhì)反相色譜固定相 已有1人參與
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反相高效液相色譜中使用的固定相大多是各種烴基硅烷的化學(xué)鍵合硅膠。烷基鏈長可以是C2、C4、C6、C8、C16、C18和C2等,最常用的是C18(又稱ODS),即十八烷基硅烷鍵合硅膠。鍵合烷基的鏈長對鍵合相的樣品負(fù)荷量、溶質(zhì)的容量因子及其選擇性有不同的影響,當(dāng)烷基鍵合相表面濃度(mol/m2)相同時,隨著烷基鏈長增加,碳含量成比例增加,溶質(zhì)保留值增加。 199年, 某公司采用帶有二丁基或異丙基等較大基團(tuán)的鹵代硅烷代替甲基鹵代烷進(jìn)行表面硅烷化制備鍵合固定相,被稱作SB技術(shù)。由于位阻效應(yīng),較大的疏水基團(tuán)從空間上起到了保護(hù)硅膠表面的作用,可明顯降低硅膠的水解作用,減少鍵合相的流失,固定相穩(wěn)定使用pH值上限達(dá)到9.0以上。SB技術(shù)解決了C8、CN和Ph固定相,特別是CN固定相的穩(wěn)定性問題。 有些硅烷鍵合相(如C8、C18)的生產(chǎn)廠家采用被稱為“封尾”( endcapping)的工藝,使硅膠擔(dān)體表面完全反應(yīng)(硅烷化)。封尾包括鍵合固定相與小分子硅烷進(jìn)行的后續(xù)反應(yīng),如三甲基氯硅烷、二甲基二氯硅烷或(不經(jīng)常的)六甲基二硅氮烷。這種方法通過反應(yīng)掉一些殘余硅羥基,增加擔(dān)體的覆蓋率,以盡量減少與溶質(zhì)發(fā)生不良作用。然而,封尾也并不能完全克服酸性硅膠擔(dān)體的缺點(diǎn),并且這些小分子的封尾基團(tuán)在低pH值反相色譜的分離中極易從固定相上水解下來,使其在pH<3時抗干擾、耐用性不強(qiáng),封尾的色譜柱在中等與高pH值(pH=6~9)時更穩(wěn)定。 改變鍵合基團(tuán)的性質(zhì),如在烷基鍵合相中引入極性基團(tuán)掩蔽殘留硅羥基,利用堿穩(wěn)定的金屬氧化物如ZrO2、TiO2、MgO等涂覆SiO2表面也能夠提高固定相的穩(wěn)定性,使其適用于更多的領(lǐng)域。此外,使用保護(hù)柱也可以對分析柱起到一定的保護(hù)作用。 作者：畢合生物 公眾號：畢合生物 畢合生物(www.bihebio.com)提供服務(wù)內(nèi)容：分子生物學(xué)、免疫, 重組蛋白及ELISA相關(guān)、活性小分子化合物、高端化學(xué)、材料化學(xué)、細(xì)胞資源庫與培養(yǎng)相關(guān)、生命科學(xué)、天然產(chǎn)物 |
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2樓2023-08-20 18:16:36
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