 |
 |
 |
 |
 |
 |
||
 |
 |
 |
 |
 |
| 2 | 1/1 | 返回列表 |
| 查看: 928 | 回復(fù): 1 | |||
流式熒光崔新蟲 (初入文壇)
|
[交流]
抗體交聯(lián)上熒光后需要加BSA嗎？ 已有1人參與
|
|
大家好，我是流式熒光崔工，一個旨在鏈接與流式熒光相關(guān)的朋友，一起賺錢、一起學(xué)習(xí)、一起工作、一起生活的靚仔。 前面的文章TCEP在抗體交聯(lián)中是如何還原抗體二硫鍵的？ 回答了一位老師提的問題。 今天有一個讀者趙菲問崔工： 我抗體交聯(lián)熒光后需要加BSA嗎？ 理解趙菲問的這個問題，我們先要理清一些概念和思路。 首先要弄清楚的就是BSA是什么？ — 1 — 那么什么是BSA呢？ BSA，中文叫牛血清白蛋白，是牛血清中的一種球蛋白， 包含607個氨基酸殘基，分子量為66.446KDa，等電點(diǎn)為4.7。 BSA是一種使用廣泛的保護(hù)封閉試劑，在生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)中應(yīng)用比較廣泛。 常用于免疫組織化學(xué) (IHC)、免疫細(xì)胞化學(xué) (ICC)、ELISA 以及蛋白質(zhì)印跡。 用于阻斷抗體的非特異性結(jié)合。 因?yàn)橛行┟冈诘蜐舛认虏环�(wěn)定或活性低。 加入BSA后，它可能起到“保護(hù)”或“載體”作用。 大家應(yīng)該知道，很多抗體中都是加了BSA的，就是為了保護(hù)抗體。 說到這，大家心中已經(jīng)有答案了吧。 答案就是抗體交聯(lián)熒光后是需要加BSA的。 — 2 — 既然要加，那如何加入？又加多少呢？ 這里又得先了解BSA得形態(tài)。 目前市面上商品化的BSA有兩種形態(tài)，一種是凍干粉，一種是液體。 如果是凍干粉的，那你根據(jù)你標(biāo)記好抗體的濃度，溶解BSA為你想要的濃度加入標(biāo)記好的抗體中就可以了。 如果是液體，那相對比較麻煩些，BSA如果是高濃度的，那又相對簡單點(diǎn)，因?yàn)槟阆♂尦赡阆胍臐舛燃尤霕?biāo)記好的抗體中就可以了。 但如果你是低濃度的BSA，就會相對復(fù)雜點(diǎn)。 比如，你可能需要先用超濾管進(jìn)行濃縮，濃縮到一定濃度后加入標(biāo)記好的抗體中。 又比如你可能需要用透析的方法。 還可能用脫鹽柱的方法。 但如果你用透析的方法，最后可能還是需要用超濾管進(jìn)行濃縮，因?yàn)橥肝鰰♂屇愕臉颖緷舛取?br /> 最方便的崔工覺得還是用脫鹽柱的方法。 具體就是先用BSA去平衡脫鹽柱，讓脫鹽柱中留下BSA。 平衡好柱子后上標(biāo)記好的抗體樣本。 這樣用脫鹽柱處理后的熒光標(biāo)記抗體中不僅含了BSA，而且標(biāo)記好的抗體濃度不會有什么影響。 那具體加多少比較合適呢？ 為了保護(hù)蛋白,大家通常是加入0.1%-1%的BSA。 如果是進(jìn)行WB或其他免疫實(shí)驗(yàn)室，大家通常是加入1-5%的BSA會用于制備封閉液。 今天的文章就分享到這，如果今天的文章對您有一點(diǎn)點(diǎn)幫忙或一絲絲的啟發(fā)，歡迎幫忙點(diǎn)個在看和轉(zhuǎn)發(fā)，也可加崔工微信進(jìn)一步交流溝通。 |
回復(fù)此樓» 猜你喜歡
0817找調(diào)劑
已經(jīng)有3人回復(fù)
-
調(diào)劑的同學(xué)，走過路過，不要錯過
已經(jīng)有14人回復(fù)
-
288求調(diào)劑085600材料與化工
已經(jīng)有14人回復(fù)
-
【求調(diào)劑】293分環(huán)境工程求調(diào)劑材料/化工，服從調(diào)劑，抗壓能力強(qiáng)！
已經(jīng)有11人回復(fù)
-
0701-322 求調(diào)劑
已經(jīng)有5人回復(fù)
-
材料與化工求調(diào)劑
已經(jīng)有3人回復(fù)
-
298求調(diào)劑
已經(jīng)有7人回復(fù)
-
288求調(diào)劑
已經(jīng)有4人回復(fù)
-
0856材料與化工290求調(diào)劑
已經(jīng)有4人回復(fù)
-
286求調(diào)劑
已經(jīng)有13人回復(fù)
» 本主題相關(guān)商家推薦: (我也要在這里推廣)
妮妮呸呸
新蟲 (小有名氣)
- 應(yīng)助: 0 (幼兒園)
- 金幣: 270.2
- 帖子: 90
- 在線: 1.3小時
- 蟲號: 29449649
- 注冊: 2022-04-09
- 專業(yè): 微生物生理與生物化學(xué)
2樓2023-03-19 18:40:32
相關(guān)版塊跳轉(zhuǎn)
我要訂閱樓主 流式熒光崔 的主題更新
| 2 | 1/1 | 返回列表 |
| 最具人氣熱帖推薦 [查看全部] | 作者 | 回/看 | 最后發(fā)表 | |
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 【求調(diào)劑】293分環(huán)境工程求調(diào)劑材料/化工，服從調(diào)劑，抗壓能力強(qiáng)！ +11 | xiiiia 2026-03-04 | 11/550 |
|
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 288求調(diào)劑 +4 | 好好- 2026-03-07 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 303求調(diào)劑 +8 | forgman95 2026-03-05 | 10/500 |
|
|
|
[考研] 化學(xué)工程求調(diào)劑 +12 | 化工人999 2026-03-04 | 12/600 |
|
|
|
[考研] 2026調(diào)劑】考試A區(qū)0703化學(xué)類323分 誠求接收 +3 | 卷柏卷柏 2026-03-05 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 求調(diào)劑 +4 | 呼呼？~+123456 2026-03-06 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 材料專碩290求調(diào)劑 +8 | 杰尼龜aaa 2026-03-04 | 8/400 |
|
|
|
[考研] 0703 東華大學(xué) 理學(xué)化學(xué)均過 a 線，總分 281 求調(diào)劑 +6 | 香香 Lu 2026-03-03 | 11/550 |
|
|
|
[考研] 287求調(diào)劑 +3 | 看看我. 2026-03-05 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 一志愿華中科技大學(xué)，化學(xué)專業(yè)344分，求調(diào)劑 +7 | 邢xing1 2026-03-02 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 0856材料與化工求調(diào)劑！ +5 | 化工考生111 2026-03-04 | 11/550 |
|
|
|
[考研] 求材料調(diào)劑 +4 | berdmond 2026-03-05 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 301求調(diào)劑 +4 | 李LJR 2026-03-04 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 281電子信息求調(diào)劑 +5 | jhtfeybgj 2026-03-02 | 9/450 |
|
|
|
[考研] 304分材料專碩求調(diào)劑 +11 | qiuzhigril 2026-03-03 | 14/700 |
|
|
|
[考研] 0856材料專碩274能調(diào)劑去哪里？ +3 | 22735 2026-03-04 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 0703化學(xué)求調(diào)劑 +3 | 將未有期 2026-03-04 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 298求調(diào)劑 +3 | 人間唯你是清歡 2026-03-03 | 4/200 |
|
|
|
[基金申請] 此成果不能導(dǎo)入原因：元數(shù)據(jù)必填信息不完整，可 進(jìn)行補(bǔ)充。 +4 | Kittylucky 2026-03-02 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 一志愿鄭大材料學(xué)碩298分，求調(diào)劑 +6 | wsl111 2026-03-01 | 6/300 |
|