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Sh畢合生物
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[交流]
PCR(生物學(xué)的聚合酶鏈反應(yīng))
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生物學(xué)可以被劃為兩個時代:一個沒有PCR,一個有PCR。沒有PCR(聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng),polymerase chain reaction)技術(shù),就沒有現(xiàn)代分子生物學(xué)。PCR技術(shù)發(fā)明者Kary Mullis,在1993年獲得化學(xué)諾貝爾獎,世界稱之為PCR教父。 PCR是干什么的 PCR全稱多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(polymerase chain reaction),是一種用于放大擴(kuò)增特定的DNA片段的分子生物學(xué)技術(shù),可以通過一種非常簡單但是高效的方法來復(fù)制DNA,它可看作是生物體外的特殊DNA復(fù)制,PCR的最大特點是能將微量的DNA大幅增加。 PCR的創(chuàng)建 Khorana (1971)等最早提出核酸體外擴(kuò)增的設(shè)想:“經(jīng)DNA變性,與合適的引物雜交,用DNA聚合酶延伸引物,并不斷重復(fù)該過程便可合成tRNA基因! 但由于當(dāng)時基因序列分析方法尚未成熟,熱穩(wěn)定DNA聚合酶尚未報道以及引物合成的困難,這種想法似乎沒有實際意義。加上70年代初分子克隆技術(shù)的出現(xiàn)提供了一種克隆和擴(kuò)增基因的途徑,所以,Khorana的設(shè)想被人們遺忘了。 1976年,中國科學(xué)家錢嘉韻,發(fā)現(xiàn)了穩(wěn)定的Taq DNA聚合酶,為PCR技術(shù)發(fā)展也做出了基礎(chǔ)性貢獻(xiàn)。 1985年,Kary Mullis在Cetus公司工作期間,發(fā)明了PCR。Mullis要合成DNA引物來進(jìn)行測序工作,卻常為沒有足夠多的模板DNA而煩惱。 1983年4月的一個星期五晚上,他開車去鄉(xiāng)下別墅的路上,猛然閃現(xiàn)出“多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)”的想法。 1983年12月,Mullis用同位素標(biāo)記法看到了10個循環(huán)后的49 bp長度的第一個PCR片段; 1985年10月25日申請了PCR的專利,1987年7月28日批準(zhǔn)(專利號4,683,202 ),Mullis是第一發(fā)明人; 1985年12月20日在Science雜志上發(fā)表了第一篇PCR的學(xué)術(shù)論文,Mullis是共同作者; 1986年5月,Mullis在冷泉港實驗室做專題報告,全世界從此開始學(xué)習(xí)PCR的方法。 到如今2013年,PCR已發(fā)展到第三代技術(shù)。 作者:畢合生物 公眾號:畢合生物 以上內(nèi)容由畢合生物(https://www.bihebio.com)提供服務(wù)內(nèi)容:分子生物學(xué)、免疫, 重組蛋白及ELISA相關(guān)、活性小分子化合物、高端化學(xué)、材料化學(xué)、細(xì)胞資源庫與培養(yǎng)相關(guān)、生命科學(xué)、天然產(chǎn)物 |
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