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rzrzbs新蟲 (初入文壇)
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[求助]
DEAE純化蛋白
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最近在用DEAE-52純化蛋白,蛋白等電點大概為4.5因為蛋白溶解性不是很好,所以想用較高ph溶液溶(ph12.5的磷酸氫二鈉-氫氧化鈉緩沖液),并用這個緩沖液作為初始緩沖液以及含鹽流動相,不知道可不可以 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
新蟲 (初入文壇)
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您好,現(xiàn)在又有問題了,我把過柱子純化的蛋白和粗品用同樣濃度和同樣的溶劑(就流動相ph12.5的緩沖液)溶解,去跑電泳,結(jié)果粗品跑出來了,但純品沒有帶條,不知道為什么 但我用考馬斯亮藍法測粗品和純品的蛋白含量,發(fā)現(xiàn)純品確實含量更高 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
專家顧問 (知名作家)
生物大分子降解酶
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新蟲 (初入文壇)
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我試過,可以洗脫出來蛋白,能用考馬斯亮藍檢測出來,應(yīng)該就沒失活吧,而且能洗脫出來峰。等電點看的文獻,我是用堿提酸沉提取的蛋白。我現(xiàn)在就怕長期用這種ph很大的緩沖液對填料有影響,我看說明書ph范圍為3-10,在位清洗可到2-11。所以很糾結(jié)要不要換ph在它這個范圍之內(nèi)的緩沖液試試 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
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