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rzrzbs新蟲(chóng) (初入文壇)
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[求助]
DEAE純化蛋白
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最近在用DEAE-52純化蛋白,蛋白等電點(diǎn)大概為4.5因?yàn)榈鞍兹芙庑圆皇呛芎,所以想用較高ph溶液溶(ph12.5的磷酸氫二鈉-氫氧化鈉緩沖液),并用這個(gè)緩沖液作為初始緩沖液以及含鹽流動(dòng)相,不知道可不可以 發(fā)自小木蟲(chóng)Android客戶端 |
銅蟲(chóng) (初入文壇)
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新蟲(chóng) (初入文壇)
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我試過(guò),可以洗脫出來(lái)蛋白,能用考馬斯亮藍(lán)檢測(cè)出來(lái),應(yīng)該就沒(méi)失活吧,而且能洗脫出來(lái)峰。等電點(diǎn)看的文獻(xiàn),我是用堿提酸沉提取的蛋白。我現(xiàn)在就怕長(zhǎng)期用這種ph很大的緩沖液對(duì)填料有影響,我看說(shuō)明書ph范圍為3-10,在位清洗可到2-11。所以很糾結(jié)要不要換ph在它這個(gè)范圍之內(nèi)的緩沖液試試 發(fā)自小木蟲(chóng)Android客戶端 |
新蟲(chóng) (初入文壇)
新蟲(chóng) (初入文壇)
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您好,現(xiàn)在又有問(wèn)題了,我把過(guò)柱子純化的蛋白和粗品用同樣濃度和同樣的溶劑(就流動(dòng)相ph12.5的緩沖液)溶解,去跑電泳,結(jié)果粗品跑出來(lái)了,但純品沒(méi)有帶條,不知道為什么 但我用考馬斯亮藍(lán)法測(cè)粗品和純品的蛋白含量,發(fā)現(xiàn)純品確實(shí)含量更高 發(fā)自小木蟲(chóng)Android客戶端 |
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