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ouyang1999新蟲 (初入文壇)
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[交流]
跪求甲烷氧化菌篩選分離方法 已有1人參與
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| 最近在做甲烷氧化菌篩選分離,采用NMS培養(yǎng)基富集,在富集液中擴增出了甲烷代謝的基因pmoA,但把富集菌液稀釋涂布到平板(除了加瓊脂,其他組分與液體培養(yǎng)基一樣)上,放在真空干燥器里,充入甲烷倒置培養(yǎng),第二天就長出來很多菌,挑單菌落做不充甲烷,放空氣里的對照,發(fā)現(xiàn)它們也長出來了,但NMS培養(yǎng)基里沒有碳源,不知道它們是靠什么碳源長出來的,之后又挑這些菌劃線在LB板上,有些在LB板上長,有些卻沒有長出來,16S測序發(fā)現(xiàn)這些菌是甲基型,但不能利用甲烷,感覺這個NMS培養(yǎng)基的選擇性好差啊,我看文獻里,好像都是7-14天才長出單菌落,是我等待時間太短嗎?我之前不知道這個培養(yǎng)基的選擇性這么差,調的都是3-4天長出來的單菌落。所以跪求同做甲烷氧化菌篩選的友友們一起探討! |
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