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ouyang1999新蟲(chóng) (初入文壇)
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[交流]
跪求甲烷氧化菌篩選分離方法 已有1人參與
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| 最近在做甲烷氧化菌篩選分離,采用NMS培養(yǎng)基富集,在富集液中擴(kuò)增出了甲烷代謝的基因pmoA,但把富集菌液稀釋涂布到平板(除了加瓊脂,其他組分與液體培養(yǎng)基一樣)上,放在真空干燥器里,充入甲烷倒置培養(yǎng),第二天就長(zhǎng)出來(lái)很多菌,挑單菌落做不充甲烷,放空氣里的對(duì)照,發(fā)現(xiàn)它們也長(zhǎng)出來(lái)了,但NMS培養(yǎng)基里沒(méi)有碳源,不知道它們是靠什么碳源長(zhǎng)出來(lái)的,之后又挑這些菌劃線(xiàn)在LB板上,有些在LB板上長(zhǎng),有些卻沒(méi)有長(zhǎng)出來(lái),16S測(cè)序發(fā)現(xiàn)這些菌是甲基型,但不能利用甲烷,感覺(jué)這個(gè)NMS培養(yǎng)基的選擇性好差啊,我看文獻(xiàn)里,好像都是7-14天才長(zhǎng)出單菌落,是我等待時(shí)間太短嗎?我之前不知道這個(gè)培養(yǎng)基的選擇性這么差,調(diào)的都是3-4天長(zhǎng)出來(lái)的單菌落。所以跪求同做甲烷氧化菌篩選的友友們一起探討! |
新蟲(chóng) (初入文壇)
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樓主問(wèn)題解決了嗎,我的也是同樣的問(wèn)題,不加碳源的時(shí)候,菌也會(huì)長(zhǎng)出來(lái) 發(fā)自小木蟲(chóng)Android客戶(hù)端 |
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