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| 【有獎(jiǎng)交流】積極回復(fù)本帖子，參與交流，就有機(jī)會(huì)分得作者 岸上手牽手 的 15 個(gè)金幣 | |||
岸上手牽手新蟲 (小有名氣)
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[交流]
抗菌物質(zhì)分離鑒定
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求各位大神指教，本人小白最近在做菌體發(fā)酵，想鑒定出發(fā)酵上清液中的抗菌物質(zhì)具體是什么。目前采用了硫酸銨沉淀，沉淀后進(jìn)行了透析，現(xiàn)在停在了透析，后續(xù)想通過層析和SDS-PAGE電泳來進(jìn)行試驗(yàn)。但目前層析遇到實(shí)驗(yàn)室沒有人做過層析，查文獻(xiàn)大多用sephadex G-75與EDTA sephadex G-75兩種層析。全基因組測序后通過BAGEL4與antiSMASH進(jìn)行了抗菌物質(zhì)預(yù)測。BAGEL4得到兩種細(xì)菌素分子是11Kd與10KD，等電點(diǎn)都在9左右�，F(xiàn)遇到以下問題：求各位大神指教 1、 現(xiàn)在后續(xù)實(shí)驗(yàn)打算使用sephadex G-75、EDTA sephadex A-25填料，sephadex G-75是根據(jù)BAGEL4預(yù)測選的、EDTA sephadex A-25是看文獻(xiàn)的（自己一直沒看懂該怎么選）。這樣兩種層析填料的選擇合理嗎？ 2、 如果填料合理或重新選擇后后續(xù)實(shí)驗(yàn)使用時(shí)可以購買sephadex G-75、EDTA sephadex A-25填料、中低壓1.6cm×30cm玻璃層析柱、蠕動(dòng)泵（借的）、沒有核算蛋白檢測儀與自動(dòng)收集器（資金有限）。這個(gè)層析實(shí)驗(yàn)?zāi)芾^續(xù)嗎？ 3、 sephadex G-75與EDTA sephadex G-75兩種層析看文獻(xiàn)前后順序兩種都有，那種順序更合理？ 4、 sephadex G-75與EDTA sephadex G-75兩種層析柱區(qū)別只是填料不同嗎？其他柱子裝置什么的可以共用嗎？ 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
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2樓2023-07-05 12:33:40
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