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小木蟲論壇-學術科研互動平臺 » 生物醫(yī)藥區(qū) » 微生物 » 發(fā)酵/表達 » 抗菌物質分離鑒定
| 查看: 952 | 回復: 1 | |||
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[交流]
抗菌物質分離鑒定
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求各位大神指教，本人小白最近在做菌體發(fā)酵，想鑒定出發(fā)酵上清液中的抗菌物質具體是什么。目前采用了硫酸銨沉淀，沉淀后進行了透析，現在停在了透析，后續(xù)想通過層析和SDS-PAGE電泳來進行試驗。但目前層析遇到實驗室沒有人做過層析，查文獻大多用sephadex G-75與EDTA sephadex G-75兩種層析。全基因組測序后通過BAGEL4與antiSMASH進行了抗菌物質預測。BAGEL4得到兩種細菌素分子是11Kd與10KD，等電點都在9左右�，F遇到以下問題：求各位大神指教 1、 現在后續(xù)實驗打算使用sephadex G-75、EDTA sephadex A-25填料，sephadex G-75是根據BAGEL4預測選的、EDTA sephadex A-25是看文獻的（自己一直沒看懂該怎么選）。這樣兩種層析填料的選擇合理嗎？ 2、 如果填料合理或重新選擇后后續(xù)實驗使用時可以購買sephadex G-75、EDTA sephadex A-25填料、中低壓1.6cm×30cm玻璃層析柱、蠕動泵（借的）、沒有核算蛋白檢測儀與自動收集器（資金有限）。這個層析實驗能繼續(xù)嗎？ 3、 sephadex G-75與EDTA sephadex G-75兩種層析看文獻前后順序兩種都有，那種順序更合理？ 4、 sephadex G-75與EDTA sephadex G-75兩種層析柱區(qū)別只是填料不同嗎？其他柱子裝置什么的可以共用嗎？ 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
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2樓2023-07-05 12:33:40
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