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大腸桿菌原核表達(dá),菌液直接SDS-PAGE跑不出來?xiàng)l帶,求助 已有2人參與
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最近在做原核表達(dá),大腸桿菌誘導(dǎo)后做SDS-PAGE,其中菌液直接跑膠上個(gè)月還能做出來,突然有一天跑不出來了,懷疑是自己操作問題。 但是超聲后的上清依然有目的蛋白表達(dá),請(qǐng)問各位是什么原因? 我的樣品處理是這樣的: 1 取誘導(dǎo)后菌液,8000g5min離心,棄上清,PBS重懸再8000g5min離心,棄上清; 2 沉淀用25%原體積的裂解buffer重懸后,+蛋白上樣buffer,95℃煮沸5min,12000g離心2min,取上清上樣 |

銅蟲 (初入文壇)


新蟲 (正式寫手)
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