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吉田bio銅蟲 (小有名氣)
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[交流]
單核吞噬細胞系統(tǒng)吞噬功能封閉動物模型
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單核吞噬細胞系統(tǒng)吞噬功能封閉動物模型 【造模機制】單核吞噬細胞系統(tǒng)(mononuclear phagocyte system,MPS)的吞噬功能與循環(huán)免疫復合物(IC)在局部沉積呈負相關。用熱凝聚 IgG(HAG)代替 IC,給小鼠靜脈注射，當HAG劑量達 Img/g時,MPS吞噬 HAG的能力達到飽和。致使造成 MPS吞噬功能被封閉。 【造模方法】選用純品系小鼠，儀器藥品，721分光光度計，熱凝聚 IgG(HAG）等。模型制作： 1.碳懸液的制備人丙種球蛋白和印度墨汁，應用時將其制備成1：4稀釋的碳懸液。 2.HAG的制備 用凝膠層析法分離人IgG,制成濃度為 40mg/ml的溶液，將其置 63℃水浴中作用25分鐘，取出后分裝，一20℃保存?zhèn)溆谩?br /> 3.小鼠碳廓清實驗 取實驗小鼠，使尾靜脈充分擴張后，向尾靜脈注射碳懸液0.01ml/g。于注射后5分鐘、15分鐘、20分鐘分別自腿內靜脈叢取血 20μ1，加于2m10.1%NazCOs溶液中，充分搖勻，然后用 721分光光度計在 675nm 波長處測定上述各樣品的光密度，計算碳廓清指數 K。 4.不同劑量HAG對MIPS吞噬功能的影響 取35只純系小鼠，隨機分成5組：第1組尾靜脈注射生理鹽水，第 2、3、4、5組分別經尾靜脈給予 0.4mg/g、0.8mg/g、1.0mg/g、1,4mg/g的HAG。注射30分鐘后，各組小鼠尾靜脈再注射 0.01ml/g的碳懸液。最后經5分鐘、15分鐘、20分鐘后從眼內靜脈叢取血 20μ1檢測光密度，并計算碳廓清指數 K。 5.模型檢測計算碳廓清指數K。 【模型特點】HAG可抑制碳廓清作用，且隨著 HAG 劑量的增加，碳廓清指數 K逐漸減少。當注射HAG達1mg/g時，再增加 HAG的劑量，碳廓清指數 K亦不再減小，同時肝脾的熒光強度也不再發(fā)生改變。即當 HAG劑量達 1mg/g時,MPS吞噬 HAG 的能力達到飽和，因而再增加 HAG的劑量，碳廓清指數不再減小。 【注意事項】尾靜脈注射時應注意一定要將試劑全部注入靜脈，否則會影響試驗結果的準確性。 【應用范圍】該模型能篩選出增強 MPS 處于飽和狀態(tài)下吞噬功能的藥物，有助于治療免疫復合物性疾病。 |
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