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吉田bio銅蟲(chóng) (小有名氣)
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單核吞噬細(xì)胞系統(tǒng)吞噬功能封閉動(dòng)物模型
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單核吞噬細(xì)胞系統(tǒng)吞噬功能封閉動(dòng)物模型 【造模機(jī)制】單核吞噬細(xì)胞系統(tǒng)(mononuclear phagocyte system,MPS)的吞噬功能與循環(huán)免疫復(fù)合物(IC)在局部沉積呈負(fù)相關(guān)。用熱凝聚 IgG(HAG)代替 IC,給小鼠靜脈注射，當(dāng)HAG劑量達(dá) Img/g時(shí),MPS吞噬 HAG的能力達(dá)到飽和。致使造成 MPS吞噬功能被封閉。 【造模方法】選用純品系小鼠，儀器藥品，721分光光度計(jì)，熱凝聚 IgG(HAG）等。模型制作： 1.碳懸液的制備人丙種球蛋白和印度墨汁，應(yīng)用時(shí)將其制備成1：4稀釋的碳懸液。 2.HAG的制備 用凝膠層析法分離人IgG,制成濃度為 40mg/ml的溶液，將其置 63℃水浴中作用25分鐘，取出后分裝，一20℃保存?zhèn)溆谩?br /> 3.小鼠碳廓清實(shí)驗(yàn) 取實(shí)驗(yàn)小鼠，使尾靜脈充分?jǐn)U張后，向尾靜脈注射碳懸液0.01ml/g。于注射后5分鐘、15分鐘、20分鐘分別自腿內(nèi)靜脈叢取血 20μ1，加于2m10.1%NazCOs溶液中，充分搖勻，然后用 721分光光度計(jì)在 675nm 波長(zhǎng)處測(cè)定上述各樣品的光密度，計(jì)算碳廓清指數(shù) K。 4.不同劑量HAG對(duì)MIPS吞噬功能的影響 取35只純系小鼠，隨機(jī)分成5組：第1組尾靜脈注射生理鹽水，第 2、3、4、5組分別經(jīng)尾靜脈給予 0.4mg/g、0.8mg/g、1.0mg/g、1,4mg/g的HAG。注射30分鐘后，各組小鼠尾靜脈再注射 0.01ml/g的碳懸液。最后經(jīng)5分鐘、15分鐘、20分鐘后從眼內(nèi)靜脈叢取血 20μ1檢測(cè)光密度，并計(jì)算碳廓清指數(shù) K。 5.模型檢測(cè)計(jì)算碳廓清指數(shù)K。 【模型特點(diǎn)】HAG可抑制碳廓清作用，且隨著 HAG 劑量的增加，碳廓清指數(shù) K逐漸減少。當(dāng)注射HAG達(dá)1mg/g時(shí)，再增加 HAG的劑量，碳廓清指數(shù) K亦不再減小，同時(shí)肝脾的熒光強(qiáng)度也不再發(fā)生改變。即當(dāng) HAG劑量達(dá) 1mg/g時(shí),MPS吞噬 HAG 的能力達(dá)到飽和，因而再增加 HAG的劑量，碳廓清指數(shù)不再減小。 【注意事項(xiàng)】尾靜脈注射時(shí)應(yīng)注意一定要將試劑全部注入靜脈，否則會(huì)影響試驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。 【應(yīng)用范圍】該模型能篩選出增強(qiáng) MPS 處于飽和狀態(tài)下吞噬功能的藥物，有助于治療免疫復(fù)合物性疾病。 |
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