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虛謹清新蟲 (初入文壇)
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原核表達囊膜糖蛋白需要去除跨膜域，將跨膜域兩側(cè)序列連接時是否要加連接肽
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試驗?zāi)康模涸吮磉_病毒囊膜糖蛋白，制備多抗 前期研究：這個病毒囊膜糖蛋白目前沒有別人做過表達的文獻可以參考，也沒有查到關(guān)于此蛋白結(jié)構(gòu)的分析，原計劃表達該蛋白全序列，但經(jīng)過多次試驗后發(fā)現(xiàn)該蛋白要么不表達、要么表達量過低，不足以進行后續(xù)試驗 現(xiàn)狀：對該蛋白序列進行分析，發(fā)現(xiàn)該蛋白n端存在17aa的信號肽，c端存在兩個相鄰的跨膜域，計劃將前端信號肽和相鄰的2段跨膜域刪去后，將跨膜域前后的序列連到一起進行表達。 蛋白總長306aa，2段跨膜域在207aa-255aa 問題1：對于同一個蛋白，只是刪去中間跨膜區(qū)，要進行表達時其前后段的序列之間是否需要添加連接肽？將添加和不添加連接肽的序列進行蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)預(yù)測，以此來判斷是否添加，這樣分析可行嗎？ 問題2：如果添加連接肽，可以使用soe-pcr的方法對兩個片段進行連接嗎？還是有更好的方法呢？@biostar2009@wizardfan |
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2樓2022-06-21 19:03:00
虛謹清
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3樓2022-06-21 19:47:36
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