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求助！SDS-PAGE 已有3人參與
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為什么SDS-PAGE中同一蛋白質(zhì)，加了沒加beta-巰基乙醇的會比加了beta-巰基乙醇的跑的更快呀，不是說SDS-PAGE蛋白質(zhì)遷移速率只和蛋白質(zhì)的分子量有關(guān)嗎 發(fā)自小木蟲IOS客戶端 |
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2樓2022-03-28 18:15:34
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小木蟲: 金幣+0.5, 給個紅包，謝謝回帖
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影響蛋白電泳速率的因素有幾點：蛋白分子量，蛋白帶電荷量，蛋白空間結(jié)構(gòu)，以及電泳體系與凝膠濃度。 而SDS-PAGE之所以說蛋白質(zhì)電泳速率只和蛋白質(zhì)分子量有關(guān)，是因為說的是變性還原性電泳，即loading buffer中含有DTT（或β-巰基乙醇）和SDS，只在這個情況下，才會只與分子量有關(guān)。 SDS攜帶負電荷，會與蛋白質(zhì)結(jié)合，大量的SDS攜帶的負電荷，使得蛋白本身攜帶的電荷影響忽略不計，因此，排除了蛋白帶電荷量對電泳速率的影響。 同時SDS作為變性劑，會使得所有的蛋白都在結(jié)構(gòu)上呈現(xiàn)棒形，同時DTT（或β-巰基乙醇）作為還原劑，可以打開蛋白的二硫鍵，兩者共同作用，排除了不同蛋白的空間結(jié)構(gòu)對電泳速率的影響。 因此，最后只與蛋白分析量相關(guān)了，而你做了β-巰基乙醇是否添加的實驗，就是改變了這個條件，電泳速率肯定是會發(fā)生變化的 |
3樓2022-09-07 11:36:39
4樓2022-10-23 07:24:23
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