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qwedfxcv新蟲 (初入文壇)
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[交流]
畢赤酵母KM71真核表達問題 已有6人參與
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| 我用畢赤酵母KM71進行表達抗菌肽,分子量為3kd-8kd之間,構建載體沒有問題,載體為pPIC9K,進行篩選也可以篩選到,用載體上的引物與我片段的引物進行驗證也沒有問題,將其電轉(zhuǎn)進KM71中,進行誘導96h,加甲醇的量為0.5%,誘導條件為250 rpm/30°,酵母生長為2升BMGY,轉(zhuǎn)1/5到BMMY中,誘導96h結束后取上清發(fā)酵液進行冷凍濃縮,之后進行考染、Western檢測,結果檢測不到蛋白,我想請問各位大佬,是否有那個重要的條件我沒有注意到,感覺蛋白根本誘導不出來。 |
木蟲 (小有名氣)
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新蟲 (初入文壇)
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