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pnpp法測脂肪酶活性
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1、ph=8的tris-hcl緩沖液的配制：6.05g tris 置于 1l 燒杯中，去離子水溶解，加入 0.1%阿拉伯樹膠粉（1g）、0.2%脫氧膽酸鈉（2g），配置成 50mmol/l ph 8.0 的tris‐hcl緩沖液。（溶液渾濁）不加脫氧膽酸鈉溶液澄清。 2、胰脂肪酶溶液：tris‐hcl 緩沖液溶解 0.25g 胰脂肪酶，混勻靜置，5 000r/min 離心 5min，取上清液，配成 1.2mg/ml 胰脂肪酶溶液（ppl），‐20℃保存。 3、底物溶液：4‐硝基苯棕櫚酸酯（pnpp）20mg 溶5ml異丙醇，再用 tris‐hcl 緩沖液定容到100ml。（溶液變渾濁）加入曲拉通-100，渾濁顯現(xiàn)未改變。 4、底物溶液：4‐硝基苯棕櫚酸酯（pnpp）2mg 溶10ml異丙醇。超聲15min，溶液變成澄清，加入酶液后，變渾濁。 想請教一下相關(guān)科研領域的大神們，有沒有做過相關(guān)實驗，渾濁是怎么回事，該怎么解決，pnpp法測脂肪酶活性實驗中要注意哪些細節(jié)，（附件圖片是參考文獻操作）已經(jīng)試了好長時間了，急求幫助，謝謝！ 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
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不才xuzhouyi
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是的，我的也是一直混濁，感覺像底物不溶于體系，實驗一直失敗，換了底物4-對硝基苯丁酸酯，現(xiàn)用現(xiàn)配，但是黃色會一直加深，吸光值一直變大，奧利司他根本測不出陽性對照 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
2樓2021-12-16 18:36:43
3樓2021-12-23 09:41:24
城南a
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