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醫(yī)學(xué)生物科研銅蟲 (小有名氣)
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細(xì)胞增殖檢測優(yōu)缺點(diǎn) 已有1人參與
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CCK-8細(xì)胞增殖檢測 CCK-8試劑中含有WST–8:化學(xué)名:2-(2-甲氧基-4-硝基苯基)-3-(4-硝基苯基)-5-(2,4-二磺酸苯)-2H-四唑單鈉鹽,它在電子載體1-甲氧基-5-甲基吩嗪 硫酸二甲酯(1-Methoxy PMS)的作用下被細(xì)胞線粒體中的脫氫酶還原為具有高度水溶性的黃色甲臜產(chǎn)物(Formazan)。生成的甲臜物的數(shù)量與活細(xì)胞的數(shù)量成正比。用酶聯(lián)免疫檢測儀在450nm波長處測定其光吸收值,可間接反映活細(xì)胞數(shù)量。該方法已被廣泛用于一些生物活性因子的活性檢測、大規(guī)模的抗腫瘤藥物篩選、細(xì)胞增殖試驗(yàn)、細(xì)胞毒性試驗(yàn)以及藥敏試驗(yàn)等。 優(yōu)點(diǎn) CCK-8試劑盒1、使用方便,省去了洗滌細(xì)胞,不需要放射性同位素和有機(jī)溶劑;2、檢測快速;3、靈敏度高,甚至可以測定較低細(xì)胞密度;4、重復(fù)性優(yōu)于MTT;5、對細(xì)胞毒性小;6、為1瓶溶液,毋需預(yù)制,即開即用。 缺點(diǎn) 1、與MTT相比,CCK-8和XTT的價(jià)格比較貴。2、CCK-8試劑的顏色為淡紅色,與含酚紅的培養(yǎng)基顏色接近,不注意的話容易產(chǎn)生漏加或多加。 專利 Cell Counting Kit-8(CCK-8試劑盒)是由日本同仁化學(xué)研究所(Dojindo)開發(fā)的檢測細(xì)胞增殖、細(xì)胞毒性的試劑盒,為MTT法的替代方法,試劑盒中采用自己開發(fā)的水溶性四唑鹽-WST-8,在日本,美國,歐洲等國家地區(qū)均持有專利,同仁化學(xué)研究所于2006年在中國獲得了WST-8的注冊商標(biāo)。 CCK-8法與普通的MTT法相比,具有顯著特點(diǎn): ★靈敏度高,數(shù)據(jù)可靠,重現(xiàn)性好 ★操作簡便,省時(shí)省力 ★水溶性,不需要換液,尤其適合于懸浮細(xì)胞 ★無需放射性同位素和有機(jī)溶劑,對細(xì)胞毒性低 ★為1瓶溶液,毋需預(yù)制,即開即用 ★適合于高通量藥物篩選 CCK-8用途:藥物篩選、細(xì)胞增殖測定、細(xì)胞毒性測定、腫瘤藥敏試驗(yàn) |
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2樓2022-06-26 11:37:15
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