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醫(yī)學(xué)生物科研銅蟲 (小有名氣)
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細胞增殖檢測優(yōu)缺點 已有1人參與
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CCK-8細胞增殖檢測 CCK-8試劑中含有WST–8:化學(xué)名:2-(2-甲氧基-4-硝基苯基)-3-(4-硝基苯基)-5-(2,4-二磺酸苯)-2H-四唑單鈉鹽,它在電子載體1-甲氧基-5-甲基吩嗪 硫酸二甲酯(1-Methoxy PMS)的作用下被細胞線粒體中的脫氫酶還原為具有高度水溶性的黃色甲臜產(chǎn)物(Formazan)。生成的甲臜物的數(shù)量與活細胞的數(shù)量成正比。用酶聯(lián)免疫檢測儀在450nm波長處測定其光吸收值,可間接反映活細胞數(shù)量。該方法已被廣泛用于一些生物活性因子的活性檢測、大規(guī)模的抗腫瘤藥物篩選、細胞增殖試驗、細胞毒性試驗以及藥敏試驗等。 優(yōu)點 CCK-8試劑盒1、使用方便,省去了洗滌細胞,不需要放射性同位素和有機溶劑;2、檢測快速;3、靈敏度高,甚至可以測定較低細胞密度;4、重復(fù)性優(yōu)于MTT;5、對細胞毒性小;6、為1瓶溶液,毋需預(yù)制,即開即用。 缺點 1、與MTT相比,CCK-8和XTT的價格比較貴。2、CCK-8試劑的顏色為淡紅色,與含酚紅的培養(yǎng)基顏色接近,不注意的話容易產(chǎn)生漏加或多加。 專利 Cell Counting Kit-8(CCK-8試劑盒)是由日本同仁化學(xué)研究所(Dojindo)開發(fā)的檢測細胞增殖、細胞毒性的試劑盒,為MTT法的替代方法,試劑盒中采用自己開發(fā)的水溶性四唑鹽-WST-8,在日本,美國,歐洲等國家地區(qū)均持有專利,同仁化學(xué)研究所于2006年在中國獲得了WST-8的注冊商標。 CCK-8法與普通的MTT法相比,具有顯著特點: ★靈敏度高,數(shù)據(jù)可靠,重現(xiàn)性好 ★操作簡便,省時省力 ★水溶性,不需要換液,尤其適合于懸浮細胞 ★無需放射性同位素和有機溶劑,對細胞毒性低 ★為1瓶溶液,毋需預(yù)制,即開即用 ★適合于高通量藥物篩選 CCK-8用途:藥物篩選、細胞增殖測定、細胞毒性測定、腫瘤藥敏試驗 |
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2樓2022-06-26 11:37:15
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