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沙墨石新蟲 (初入文壇)
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[交流]
鎳柱親和層析，純化結(jié)果總是有三四十kDa的雜蛋白 已有4人參與
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請教一下，用大腸桿菌表達(dá)目的蛋白，超聲破碎后，使用鎳柱親和層析時(shí)，填料是Ni-IMAC，結(jié)合緩沖液是20mmol/L的Tris-HCl，500mmol/L NaCl，pH7.5。 SDS-PAGE蛋白膠圖上，總是有三四十kDa的雜蛋白，應(yīng)該怎樣提高純化效果呢？ |
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4樓2021-09-06 18:11:45
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可能性之一是質(zhì)粒帶的抗性蛋白。表達(dá)量高，如果剛好有幾個(gè)his，也容易掛在鎳柱上。梯度洗脫可以提高純度 發(fā)自小木蟲IOS客戶端 |
5樓2021-11-25 12:10:00
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