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醫(yī)學生物科研銅蟲 (小有名氣)
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小鼠乳腺癌4T1-luc細胞實驗肺轉(zhuǎn)移模型構(gòu)建-北京百奧思科生物分享 已有1人參與
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小鼠肺轉(zhuǎn)移癌模型是科研實驗中比較常用的并且經(jīng)濟的動物模型,理想肺轉(zhuǎn)移模型的建立可以為研究疾病發(fā)生的機制及藥物作用效果奠定基礎。 一、 動物選擇 一般選擇4-6周齡BALB/c或者C57BL/6小鼠,需要提前到飼養(yǎng)環(huán)境中適應1周。 二、接種部位與接種細胞量 通過尾靜脈注射,細胞量一般是1-5*106個/200ul。也可以通過皮下注射相同的細胞量,不同的細胞系的接種量略有差別。 三、細胞系的選擇與狀態(tài)調(diào)整 目前實驗室已經(jīng)驗證小鼠乳腺癌細胞系(4T1)和小鼠肺癌細胞(LLC)能夠成功構(gòu)建肺轉(zhuǎn)移癌模型,細胞狀態(tài)調(diào)整到對數(shù)生長期,失敗率極低。其他種類的細胞規(guī)律行不強,還有待驗證。 四、模型轉(zhuǎn)移周期 尾靜脈注射轉(zhuǎn)移的周期大概是2-3周,皮下注射轉(zhuǎn)移的周期會增加至3-4周。 五、如何判斷模型是否構(gòu)建成功? 1.活體成像 尾靜脈或者皮下接種穩(wěn)轉(zhuǎn)luciferase熒光素酶的可以明顯觀察到熒光信號 2.病理剖檢 在肺組織的表面可以明顯看到癌細胞轉(zhuǎn)移灶 3.正常的肺組織染色結(jié)構(gòu)清晰,肺轉(zhuǎn)移癌組織會被瘤細胞破壞原有結(jié)構(gòu) |
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2樓2021-12-09 11:03:25
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