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醫(yī)學(xué)生物科研銅蟲(chóng) (小有名氣)
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小鼠乳腺癌4T1-luc細(xì)胞實(shí)驗(yàn)肺轉(zhuǎn)移模型構(gòu)建-北京百奧思科生物分享 已有1人參與
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小鼠肺轉(zhuǎn)移癌模型是科研實(shí)驗(yàn)中比較常用的并且經(jīng)濟(jì)的動(dòng)物模型,理想肺轉(zhuǎn)移模型的建立可以為研究疾病發(fā)生的機(jī)制及藥物作用效果奠定基礎(chǔ)。 一、 動(dòng)物選擇 一般選擇4-6周齡BALB/c或者C57BL/6小鼠,需要提前到飼養(yǎng)環(huán)境中適應(yīng)1周。 二、接種部位與接種細(xì)胞量 通過(guò)尾靜脈注射,細(xì)胞量一般是1-5*106個(gè)/200ul。也可以通過(guò)皮下注射相同的細(xì)胞量,不同的細(xì)胞系的接種量略有差別。 三、細(xì)胞系的選擇與狀態(tài)調(diào)整 目前實(shí)驗(yàn)室已經(jīng)驗(yàn)證小鼠乳腺癌細(xì)胞系(4T1)和小鼠肺癌細(xì)胞(LLC)能夠成功構(gòu)建肺轉(zhuǎn)移癌模型,細(xì)胞狀態(tài)調(diào)整到對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期,失敗率極低。其他種類的細(xì)胞規(guī)律行不強(qiáng),還有待驗(yàn)證。 四、模型轉(zhuǎn)移周期 尾靜脈注射轉(zhuǎn)移的周期大概是2-3周,皮下注射轉(zhuǎn)移的周期會(huì)增加至3-4周。 五、如何判斷模型是否構(gòu)建成功? 1.活體成像 尾靜脈或者皮下接種穩(wěn)轉(zhuǎn)luciferase熒光素酶的可以明顯觀察到熒光信號(hào) 2.病理剖檢 在肺組織的表面可以明顯看到癌細(xì)胞轉(zhuǎn)移灶 3.正常的肺組織染色結(jié)構(gòu)清晰,肺轉(zhuǎn)移癌組織會(huì)被瘤細(xì)胞破壞原有結(jié)構(gòu) |
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2樓2021-12-09 11:03:25
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