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Claircat新蟲 (小有名氣)
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[求助]
利用NBT光還原法測定擬南芥sod活性
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我是按照生化實(shí)驗(yàn)書本的做法。 課本描述“在氧化物質(zhì)存在時,核黃素可被光還原,被還原的核黃素在有氧條件下極易再氧化產(chǎn)生超氧自由基。加入NBT后,光照條件下,NBT與超氧自由基反應(yīng)呈黃色(單甲月替),繼而還原成藍(lán)色(二甲月替),在560nm有最大吸收峰。加入SOD可以使超氧自由基與H+反應(yīng),從而抑制了NBT光還原的進(jìn)行” 我按照實(shí)驗(yàn)要求加入試劑和酶提取液之后,在室溫日光下放置10min,反應(yīng)液依舊是黃色的,沒有變藍(lán)。我不確定是反應(yīng)時間不足,或者是其他問題。 我的反應(yīng)體系是放在10ml離心管,反應(yīng)時蓋上蓋子。 |
新蟲 (初入文壇)
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反應(yīng)液就該是黃色的吧,沒有加酶液并且照光的對照管才應(yīng)該顯出藍(lán)色,酶活越強(qiáng),反應(yīng)液就越是黃色,只有酶活較弱時,才會出現(xiàn)藍(lán)色 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
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