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Claircat新蟲 (小有名氣)
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[求助]
利用NBT光還原法測(cè)定擬南芥sod活性
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我是按照生化實(shí)驗(yàn)書本的做法。 課本描述“在氧化物質(zhì)存在時(shí)，核黃素可被光還原，被還原的核黃素在有氧條件下極易再氧化產(chǎn)生超氧自由基。加入NBT后，光照條件下，NBT與超氧自由基反應(yīng)呈黃色（單甲月替），繼而還原成藍(lán)色（二甲月替），在560nm有最大吸收峰。加入SOD可以使超氧自由基與H+反應(yīng)，從而抑制了NBT光還原的進(jìn)行” 我按照實(shí)驗(yàn)要求加入試劑和酶提取液之后，在室溫日光下放置10min，反應(yīng)液依舊是黃色的，沒有變藍(lán)。我不確定是反應(yīng)時(shí)間不足，或者是其他問題。 我的反應(yīng)體系是放在10ml離心管，反應(yīng)時(shí)蓋上蓋子。 |
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反應(yīng)液就該是黃色的吧，沒有加酶液并且照光的對(duì)照管才應(yīng)該顯出藍(lán)色，酶活越強(qiáng)，反應(yīng)液就越是黃色，只有酶活較弱時(shí)，才會(huì)出現(xiàn)藍(lán)色 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
2樓2022-04-16 10:59:27
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