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只為成才鐵蟲 (小有名氣)
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[交流]
腸桿菌 基因敲除 詭異事件，求解！ 已有1人參與
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請教大家，我敲了一個基因（通過引入一個抗性片段），現(xiàn)在挑選 抗性板上的菌落 用 外部引物PCR片段測序，是敲除成功的，因為測序結(jié)果就是含有抗性片段，但是內(nèi)部引物PCR也還是能檢測到，測序結(jié)果表明也是我要敲除的那個基因，請問是什么原因？ 1. 有點詭異的是，以前內(nèi)部引物只有一個條帶，后來長出來的pcr發(fā)現(xiàn)有好幾個條帶了！ 2. 不知道有沒有這樣子的原因，我敲除的片段是該基因的五分之四，ATG開頭的五分之一沒有敲除，這樣子會有影響嗎？但是我設(shè)計的內(nèi)部引物是后面部分的 這個菌我已經(jīng)在抗性板上劃線傳代兩次了！ |
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只為成才
鐵蟲 (小有名氣)
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3樓2021-07-21 12:47:18
克隆大蝦
鐵桿木蟲 (著名寫手)
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2樓2021-07-21 10:05:50
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