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abcdeojg新蟲 (初入文壇)
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現(xiàn)在需要敲除酵母的一個基因，同源重組的方法。問題1.必須用質(zhì)粒敲嗎？可以用片段來敲嗎？2. 想做這個基因上下游的引物，我要怎么才能找到這個基因上下游的序列呢？感激感激！ 發(fā)自小木蟲IOS客戶端 |
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【答案】應(yīng)助回帖
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首先，你要清楚質(zhì)粒的作用是什么，在大部分情況下，質(zhì)粒就是我們說的載體，重組載體是將宿主適用的質(zhì)粒和基因片段連接在一起的環(huán)狀DNA，質(zhì)粒的作用就是一個運輸?shù)墓ぞ�，將你的片段帶入到酵母體內(nèi)，同時質(zhì)粒會攜帶一些在酵母體復(fù)制表達、位點識別、基因重組所需的基因元件及抗性篩選元件，可以讓你的基因片段進入酵母細胞內(nèi)正常的復(fù)制和發(fā)揮作用，單獨的一個基因片段無法進入酵母細胞，更不要說發(fā)揮作用了。就類似運載火箭和衛(wèi)星的關(guān)系，沒有火箭，衛(wèi)星再高級也進入不到軌道發(fā)揮作用。 其次，你目的基因的序列應(yīng)該是知道的，對于他上下游的序列，你可以到數(shù)據(jù)庫里面去找到基因組序列，選擇你目的基因位置后，前后的序列就是你需要找到的。 |
3樓2021-06-01 17:41:22
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