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現(xiàn)在需要敲除酵母的一個(gè)基因，同源重組的方法。問(wèn)題1.必須用質(zhì)粒敲嗎？可以用片段來(lái)敲嗎？2. 想做這個(gè)基因上下游的引物，我要怎么才能找到這個(gè)基因上下游的序列呢？感激感激！ 發(fā)自小木蟲(chóng)IOS客戶(hù)端 |
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2樓2021-05-19 18:08:16
原海亮
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【答案】應(yīng)助回帖
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首先，你要清楚質(zhì)粒的作用是什么，在大部分情況下，質(zhì)粒就是我們說(shuō)的載體，重組載體是將宿主適用的質(zhì)粒和基因片段連接在一起的環(huán)狀DNA，質(zhì)粒的作用就是一個(gè)運(yùn)輸?shù)墓ぞ�，將你的片段帶入到酵母體內(nèi)，同時(shí)質(zhì)粒會(huì)攜帶一些在酵母體復(fù)制表達(dá)、位點(diǎn)識(shí)別、基因重組所需的基因元件及抗性篩選元件，可以讓你的基因片段進(jìn)入酵母細(xì)胞內(nèi)正常的復(fù)制和發(fā)揮作用，單獨(dú)的一個(gè)基因片段無(wú)法進(jìn)入酵母細(xì)胞，更不要說(shuō)發(fā)揮作用了。就類(lèi)似運(yùn)載火箭和衛(wèi)星的關(guān)系，沒(méi)有火箭，衛(wèi)星再高級(jí)也進(jìn)入不到軌道發(fā)揮作用。 其次，你目的基因的序列應(yīng)該是知道的，對(duì)于他上下游的序列，你可以到數(shù)據(jù)庫(kù)里面去找到基因組序列，選擇你目的基因位置后，前后的序列就是你需要找到的。 |
3樓2021-06-01 17:41:22
cTiyAmo
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4樓2022-03-02 09:49:55
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