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winnerwfy新蟲 (初入文壇)
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枯草芽孢桿菌整合型質(zhì)粒電轉(zhuǎn)化效率 已有3人參與
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| 請問有做過枯草芽孢桿菌整合型質(zhì)粒pAX01和pDG1730的電轉(zhuǎn)化的嗎？同樣的過程，電轉(zhuǎn)化加入300ng質(zhì)粒，游離型質(zhì)粒能長上百個(gè)，整合型的卻一個(gè)不長，是不是需要更多的質(zhì)粒，這樣的結(jié)果表明轉(zhuǎn)化效率低還是整合效率極低？ |
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yyyycc2021
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6樓2022-07-28 18:09:58
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最近也在做枯草芽孢桿菌的電轉(zhuǎn)實(shí)驗(yàn)，但做了很久只成功過一兩次，目前遇到以下問題： 1、電擊時(shí)間常數(shù)達(dá)不到4ms，使用的是biorad的micropulser，應(yīng)該用哪個(gè)程序會比較好？我目前使用Agr的預(yù)設(shè)程序，2.2kv，0.1cm電擊杯 2、電轉(zhuǎn)后挑的菌搖不起來，很清澈，或者是需要搖很久才渾濁，是電轉(zhuǎn)的質(zhì)粒影響菌的生長還是電轉(zhuǎn)復(fù)蘇的問題？我用的是RM培養(yǎng)基（加了海藻糖），100rpm，37度復(fù)蘇 請大家?guī)蛶兔~ 在課題組只有我一人做枯草芽孢桿菌，能請教的人實(shí)在不多 發(fā)自小木蟲IOS客戶端 |
4樓2021-10-10 13:45:18
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