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winnerwfy新蟲 (初入文壇)
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[求助]
枯草芽孢桿菌整合型質(zhì)粒電轉(zhuǎn)化效率 已有3人參與
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| 請問有做過枯草芽孢桿菌整合型質(zhì)粒pAX01和pDG1730的電轉(zhuǎn)化的嗎?同樣的過程,電轉(zhuǎn)化加入300ng質(zhì)粒,游離型質(zhì)粒能長上百個(gè),整合型的卻一個(gè)不長,是不是需要更多的質(zhì)粒,這樣的結(jié)果表明轉(zhuǎn)化效率低還是整合效率極低? |
銅蟲 (著名寫手)

新蟲 (初入文壇)
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最近也在做枯草芽孢桿菌的電轉(zhuǎn)實(shí)驗(yàn),但做了很久只成功過一兩次,目前遇到以下問題: 1、電擊時(shí)間常數(shù)達(dá)不到4ms,使用的是biorad的micropulser,應(yīng)該用哪個(gè)程序會比較好?我目前使用Agr的預(yù)設(shè)程序,2.2kv,0.1cm電擊杯 2、電轉(zhuǎn)后挑的菌搖不起來,很清澈,或者是需要搖很久才渾濁,是電轉(zhuǎn)的質(zhì)粒影響菌的生長還是電轉(zhuǎn)復(fù)蘇的問題?我用的是RM培養(yǎng)基(加了海藻糖),100rpm,37度復(fù)蘇 請大家?guī)蛶兔~ 在課題組只有我一人做枯草芽孢桿菌,能請教的人實(shí)在不多 發(fā)自小木蟲IOS客戶端 |
新蟲 (初入文壇)
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