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小樹懶很好新蟲 (小有名氣)
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his蛋白掛柱效率低 已有1人參與
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C端6xhis蛋白（108kda）純化時，使用GE的6FF樹脂，載量為每毫升樹脂載40mg標(biāo)簽蛋白，確定不過載。 且質(zhì)粒測序結(jié)果正確，ORF框及his標(biāo)簽均正確。 嘗試將his標(biāo)簽增加至10his，或在N端再添加 6xhis后，仍在流出液中有大量目的蛋白存在。 改變上柱的粗酶液的濃度及上樣標(biāo)簽蛋白量也沒能改善 求助該如何解決呢 @hc-material @gyesang 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
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2樓2021-04-19 00:43:42
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3樓2021-04-19 00:43:59
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4樓2021-04-19 12:31:53
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5樓2021-04-19 19:08:12
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我們老師不太想換標(biāo)簽，怕萬一換了標(biāo)簽還是純化不出來，白費時間，想看看大家有沒有過類似的成功案例，能拿來借鑒一下 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
6樓2021-04-19 19:10:30
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7樓2021-04-19 22:40:11
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1.上樣我們一般咪唑濃度20mM。2.載量我們一般計算動態(tài)載量，最大載量我們一般是不考慮的，動態(tài)載量一般是最大載量的百分之30。3.根據(jù)柱直徑，柱床高度，降低上樣速度。 發(fā)自小木蟲IOS客戶端 |
8樓2021-04-22 19:53:55
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