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多肽色譜峰拖尾 已有1人參與
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本人做的一個多肽藥物，分子量大約4000，方法轉(zhuǎn)出方提供色譜條件：水相：0.1%三氟乙酸水，有機(jī)相：0.1%三氟乙酸乙腈，梯度系統(tǒng)，色譜柱waters xbridge 4.6*150mm，5um。主峰峰形良好，未見明顯拖尾且方法穩(wěn)定。 方法轉(zhuǎn)移至本實(shí)驗(yàn)室后，除液相品牌不同，色譜柱規(guī)格等完全一致。發(fā)現(xiàn)剛開始進(jìn)樣時色譜峰峰形尖銳（第一張圖），進(jìn)樣約40針后主峰明顯拖尾（第二張圖），拖尾因子約3點(diǎn)多，將水相和有機(jī)相三氟乙酸比例調(diào)至0.3%后色譜峰峰形變好，拖尾因子約1.2。然而重復(fù)實(shí)驗(yàn)約10個分析批后，色譜峰再次拖尾明顯，將三氟乙酸比例調(diào)至0.5%峰形有所好轉(zhuǎn)。 經(jīng)過比較，色譜柱壓力跟第一次實(shí)驗(yàn)時基本無變化，且按工程師指導(dǎo)用乙腈水等充分沖洗色譜柱，未見峰形變好，只有通過調(diào)節(jié)三氟乙酸比例觀察到有所好轉(zhuǎn)。求助各位站友，這種情況該如何繼續(xù)實(shí)驗(yàn)，非常擔(dān)心再次買一根新柱子后又是這種情況。 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
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2樓2021-04-25 09:56:13
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