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多肽色譜峰拖尾 已有1人參與
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本人做的一個多肽藥物,分子量大約4000,方法轉(zhuǎn)出方提供色譜條件:水相:0.1%三氟乙酸水,有機相:0.1%三氟乙酸乙腈,梯度系統(tǒng),色譜柱waters xbridge 4.6*150mm,5um。主峰峰形良好,未見明顯拖尾且方法穩(wěn)定。 方法轉(zhuǎn)移至本實驗室后,除液相品牌不同,色譜柱規(guī)格等完全一致。發(fā)現(xiàn)剛開始進(jìn)樣時色譜峰峰形尖銳(第一張圖),進(jìn)樣約40針后主峰明顯拖尾(第二張圖),拖尾因子約3點多,將水相和有機相三氟乙酸比例調(diào)至0.3%后色譜峰峰形變好,拖尾因子約1.2。然而重復(fù)實驗約10個分析批后,色譜峰再次拖尾明顯,將三氟乙酸比例調(diào)至0.5%峰形有所好轉(zhuǎn)。 經(jīng)過比較,色譜柱壓力跟第一次實驗時基本無變化,且按工程師指導(dǎo)用乙腈水等充分沖洗色譜柱,未見峰形變好,只有通過調(diào)節(jié)三氟乙酸比例觀察到有所好轉(zhuǎn)。求助各位站友,這種情況該如何繼續(xù)實驗,非常擔(dān)心再次買一根新柱子后又是這種情況。 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
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