| 5 | 1/1 | 返回列表 |
| 查看: 2170 | 回復: 12 | |||
| 【懸賞金幣】回答本帖問題,作者Ma丶lone將贈送您 30 個金幣 | |||
| 當前只顯示滿足指定條件的回帖,點擊這里查看本話題的所有回帖 | |||
[求助]
求助,畢赤酵母系統(tǒng)表達阿魏酸酯酶,蛋白沒有活性,可能哪些問題,該怎么解決現狀? 已有2人參與
|
|||
|
本人初入分子生物,用PPIZCA質粒重組了阿魏酸酯酶的基因序列,然后我把重組質粒導入畢赤酵母中。結果是,PCR和測序驗證基因大小和序列沒問題,western blot也做了能看到所在處清晰的條帶,但是有一次出現了包涵體,這一次沒有,我用這一次的粗酶液和提純的蛋白測試酶活性,結果一點活性沒有。請教大佬幫我分析一下可能的原因和解決辦法。 @gyesang @hc-material 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
|
嗯嗯,我的是胞內表達,用的200w,10s超聲,10s停止,一共20min的超聲條件,加了ripa和pi,我這個是水解酶,不知道是我在提的過程中失活了。對了,我的粗酶液酶活檢測,是我50毫升培養(yǎng)液取了100微升的上清做的活性檢測,這個量是有些少了嗎?一般需要富集粗酶液嗎? 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
捐助貴賓 (著名寫手)
版主 (著名寫手)
己所不欲,勿施于人

木蟲 (著名寫手)

| 最具人氣熱帖推薦 [查看全部] | 作者 | 回/看 | 最后發(fā)表 | |
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 271求調劑 +4 | 生如夏花… 2026-03-11 | 4/200 |
|
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 一志愿浙江大學0856材料與化工求調劑 +3 | yansheng@211 2026-03-09 | 4/200 |
|
|
[考研] 083000環(huán)境科學與工程調劑 +8 | mingmingry 2026-03-09 | 9/450 |
|
|
[考研] 材料工程307,求調劑 +7 | 我要燃燒你的夢 2026-03-08 | 7/350 |
|
|
[考研] 086000生物與醫(yī)藥319分求調劑 +4 | Tolkien 2026-03-07 | 8/400 |
|
|
[考研] 265求調劑 +8 | 小木蟲085600 2026-03-09 | 11/550 |
|
|
[考研] 0817化學工程319求調劑 +7 | lv945 2026-03-08 | 9/450 |
|
|
[考研] 材料與化工 一志愿山大 321分 求調劑 +6 | 每天散步 2026-03-09 | 7/350 |
|
|
[考博] 2026博士申請 +6 | 起泡酒 2026-03-08 | 6/300 |
|
|
[考研] 化工284求調劑 +12 | 小黑想變白 2026-03-07 | 12/600 |
|
|
[考研] 0817找調劑 +6 | kk扛 2026-03-08 | 6/300 |
|
|
[考研] 290 材料與化工求調劑 +7 | Nebulala 2026-03-08 | 7/350 |
|
|
[考研]
|
Sixuan wang 2026-03-06 | 7/350 |
|
|
[考研] 085701環(huán)境工程專業(yè),初試305,均過國家A區(qū)線 +7 | 卡卡來了@ 2026-03-07 | 8/400 |
|
|
[考研] 求調劑,不管什么專業(yè),我是可塑造的人才一枚,希望遇到知己老師撈撈我 +4 | 13102137290 2026-03-06 | 5/250 |
|
|
[考研] 化學290求調劑 +3 | 兩顆 西柚 2026-03-07 | 4/200 |
|
|
[考研] 求調劑 +4 | 呼呼?~+123456 2026-03-05 | 5/250 |
|
|
[考研] 求調劑 +4 | 呼呼?~+123456 2026-03-06 | 4/200 |
|
|
[考研] 08工科求調劑 +3 | 隆LLL 2026-03-06 | 4/200 |
|
|
[考研] 考研282分求調劑,接受跨專業(yè) +4 | 劉淄博 2026-03-04 | 7/350 |
|