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[交流]
關于細胞破碎技術與方法，一起了解下~ 已有4人參與
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簡介：一枚生命科學行業(yè)技術控~ 共同學習，歡迎指正補充，感謝支持回帖~ 細胞破碎技術的定義¬——細胞破碎技術是指利用外力破壞細胞膜和細胞壁，使細胞內容物包括目的產物成分釋放出來的技術，是分離純化細胞內容合成的非分泌型生化 物質（產品）的基礎。結合重組DNA技術和組織培養(yǎng)技術上的重大進展，以前認為很難獲得的蛋白質現(xiàn)在可以大規(guī)模生產。 在生物學研究中，除了某些細胞外的多肽激素和某些蛋白質與酶以外，經常會對細胞或組織進行破碎處理，使生物大分子充分釋放到溶液中，并不丟失生物活性，最終目的是獲得細胞內的物質。不同的生物體或同一生物體的不同部位的組織，其細胞破碎的難易不一，使用的方法也不相同，如動物臟器的細胞膜較脆弱，容易破碎，植物和微生物由于具有較堅固的纖維素、半纖維素組成的細胞壁，要采取專門的細胞破碎方法。 由于細菌、酵母、真菌、植物都有細胞壁，但成分不同，且同類細胞結成的網(wǎng)狀結構不同，因此其細胞壁的堅固程度不同，總體呈現(xiàn)遞增態(tài)勢。動物細胞雖然沒有細胞壁，但具有細胞膜，也需要一定的細胞破碎方法來破膜，達到提取產物的目的。 NO.1 滲透沖擊破碎法 一種較為溫和的破碎方法，將細胞放在高滲透壓的溶液中（如一定濃度的甘油或蔗糖溶液），由于滲透壓的作用，細胞內水分便向外滲透，細胞發(fā)生收縮，當達到平衡后，將介質快速稀釋，或將細胞轉入水或緩沖液中，由于滲透壓的突然變化，胞外的水迅速滲入胞內，引起細胞快速膨脹而破裂。 NO.2 反復凍融法 將細胞放在低溫下冷凍（約-15℃），然后在室溫中融化，反復多次而達到破壁作用。由于冷凍，一方面能使細胞膜的疏水鍵結構破裂，從而增加細胞的親水性能，另一方面胞內水結晶，形成冰晶粒，引起細胞膨脹破裂。對于細胞壁較脆弱的菌體，可采用此法。 NO.3 酶溶液破碎法 利用各種水解酶，如溶菌酶等，將細胞壁分解，使細胞內含物釋放出來。此法適合多種微生物。 NO.4 化學試劑法 某些有機溶劑（如苯、甲苯）、抗生素、表面活性劑、金屬螯合劑、變性劑等化學藥品都可以改變細胞壁或膜的通透性從而使內含物有選擇的滲透出來。有些動物細胞，例如腫瘤細胞可采用十二烷基磺酸鈉（SDS）、去氧膽酸鈉等細胞膜破壞。 互動回帖吧 在對細胞破碎的學習、研究過程中，你還遇到其他哪些問題和感悟呢？歡迎回帖分享，共同學習，共同進步。 |
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2樓2021-03-10 08:59:41
★
小木蟲: 金幣+0.5, 給個紅包，謝謝回帖
小木蟲: 金幣+0.5, 給個紅包，謝謝回帖
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破碎的話，樣品反復凍溶、化學試劑和酶溶液都可以用，就是殘留比較麻煩，后期純化比較費事，得率不太穩(wěn)定，不知道蟲友或樓主有什么可以推薦 發(fā)自小木蟲IOS客戶端 |
3樓2021-03-10 09:12:34
tjw0824
木蟲 (著名寫手)
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4樓2021-03-11 07:03:40
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6樓2022-07-11 10:09:07
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