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DNS法測定纖維素酶活的問題 已有2人參與
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我最近在測纖維素降解菌的酶活力。這些菌有做過剛果紅染色的纖維素平板,是明顯有水解圈的。養(yǎng)在cmc-na發(fā)酵培養(yǎng)基里也有明顯的渾濁。但是取粗提酶液用DNS法測了以后是完全沒有酶活,不知道是為什么。另外,DNS試劑做葡萄糖的標曲也碰到了問題:加dns試劑后吸光度一直不穩(wěn)定,越來越高,這是什么原因,請問有人遇到過嗎? 非常急,希望有做過的大神能給解答!必有重謝!! 發(fā)自小木蟲IOS客戶端 |
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現(xiàn)在發(fā)現(xiàn)問題是在低濃度的時候測不出吸光度。我做標曲的時候發(fā)現(xiàn)葡萄糖濃度為0.2mg/mL的時候吸光度只有0.00幾,幾乎就是空白了(梯度是按文獻做的0 0.2 0.4 0.6 0.8 1.0),0.4-1.0范圍吸光度和別人的吻合,但就是0.2測不出吸光度。我現(xiàn)在猜測可能就是因為30分鐘酶活反應(yīng)產(chǎn)生的還原糖的量就在這個測不出吸光度的范圍,所以我才會測不出酶活。但是為什么測不出吸光度我琢磨了好久也沒有研究出來,不知道您有沒有遇到過這種情況 ![]() 發(fā)自小木蟲IOS客戶端 |
新蟲 (正式寫手)
新蟲 (初入文壇)
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延長酶反應(yīng)時間試一試,標準曲線做不好可能與試劑配得不好或者反應(yīng)方法不當有關(guān)。 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
新蟲 (小有名氣)
新蟲 (小有名氣)
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我之前也以為dns失效了,但是后來買了現(xiàn)成的也是一樣的問題。就是在低濃度的時候測不出吸光度(葡萄糖濃度小于0.2mg/mL的時候) 發(fā)自小木蟲IOS客戶端 |
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