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[求助]
DNS法測定纖維素酶活的問題 已有2人參與
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我最近在測纖維素降解菌的酶活力。這些菌有做過剛果紅染色的纖維素平板，是明顯有水解圈的。養(yǎng)在cmc-na發(fā)酵培養(yǎng)基里也有明顯的渾濁。但是取粗提酶液用DNS法測了以后是完全沒有酶活，不知道是為什么。另外，DNS試劑做葡萄糖的標(biāo)曲也碰到了問題：加dns試劑后吸光度一直不穩(wěn)定，越來越高，這是什么原因，請問有人遇到過嗎？ 非常急，希望有做過的大神能給解答！必有重謝�。�！ 發(fā)自小木蟲IOS客戶端 |
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現(xiàn)在發(fā)現(xiàn)問題是在低濃度的時候測不出吸光度。我做標(biāo)曲的時候發(fā)現(xiàn)葡萄糖濃度為0.2mg/mL的時候吸光度只有0.00幾，幾乎就是空白了（梯度是按文獻做的0 0.2 0.4 0.6 0.8 1.0），0.4-1.0范圍吸光度和別人的吻合，但就是0.2測不出吸光度。我現(xiàn)在猜測可能就是因為30分鐘酶活反應(yīng)產(chǎn)生的還原糖的量就在這個測不出吸光度的范圍，所以我才會測不出酶活。但是為什么測不出吸光度我琢磨了好久也沒有研究出來，不知道您有沒有遇到過這種情況  發(fā)自小木蟲IOS客戶端 |
13樓2021-04-08 13:15:23
碎夢醉蝶
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2樓2021-01-29 09:55:07
青燈與酒
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6樓2021-03-23 11:47:14
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5樓2021-02-04 17:33:52
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TerryHLHL(fuyuandj86代發(fā)): 金幣+5 2021-04-26 18:14:34
TerryHLHL(fuyuandj86代發(fā)): 金幣+5 2021-04-26 18:14:34
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延長酶反應(yīng)時間試一試，標(biāo)準(zhǔn)曲線做不好可能與試劑配得不好或者反應(yīng)方法不當(dāng)有關(guān)。 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
7樓2021-03-26 13:36:16
海韻楠馨
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8樓2021-04-03 16:20:56
海韻楠馨
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9樓2021-04-03 16:23:03
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我之前也以為dns失效了，但是后來買了現(xiàn)成的也是一樣的問題。就是在低濃度的時候測不出吸光度（葡萄糖濃度小于0.2mg/mL的時候） 發(fā)自小木蟲IOS客戶端 |
10樓2021-04-08 13:01:19
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