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王振操新蟲 (小有名氣)
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[求助]
體外用DCFH測(cè)ROS的生成
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體外測(cè)光敏劑的ROS的生成。在0s的時(shí)候有個(gè)I0，比較多種光敏劑的生成ROS的速率的時(shí)候用I/I0作點(diǎn)線圖。但是各種光敏劑在0s的時(shí)候可能會(huì)增加I0的熒光強(qiáng)度，導(dǎo)致各自I0不同，這時(shí)候到最后即使DCFH完全反應(yīng)完I一樣，但是I比I0不一樣。請(qǐng)問這時(shí)候怎么處理。 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
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wolfghost: 博學(xué)EPI+1 2021-03-14 22:34:55
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DCFH測(cè)活性氧的原理是因?yàn)槠浔旧頉]有熒光，但是被氧化后變成有熒光的分子。所以你孵育時(shí)間足夠長(zhǎng)的話看，最終所有的DCFH終歸會(huì)變成有熒光的分子。 如果想測(cè)ROS的釋放速率，那么最好實(shí)驗(yàn)的前提假設(shè)是每組所使用的DCFH是大過量的且等量的，這時(shí)候可以近似處理為一個(gè)一級(jí)反應(yīng)（pseudo-first order reaction），也就是熒光的生成速率只取決于ROS的含量。 具體來說，樓主最好的方法是用deltaI/(Imax - I0) vs 時(shí)間做圖,只算初始一小段時(shí)間的斜率，即計(jì)算熒光強(qiáng)度的增速。其中deltaI為某個(gè)時(shí)間點(diǎn)熒光強(qiáng)度的增量，Imax為最終熒光強(qiáng)度，I0為初始熒光強(qiáng)度 |
2樓2021-01-25 14:44:20
王振操
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4樓2025-08-18 14:02:46
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