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[求助]
蛋白純化析出
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| 蛋白等電點為7.22，我用的緩沖液是磷酸緩沖液，pH為8.0，500mM的NaCl，500mM的咪唑，鎳柱純化蛋白，蛋白被洗下來以后，冰上放置，會隨時間的增加，析出越多，2個小時就有沉淀生成，蛋白濃度在3mg/ml左右，后來在緩沖液中加了2mM的β-巰基乙醇，一樣析出，離心取上清，我分別用離子濃度為150mM和400mM的透析液透析過夜，一樣是析出，跪求大佬，這種情況應(yīng)該考慮什么因素？謝謝 |
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