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wym77新蟲(chóng) (初入文壇)
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[求助]
蛋白純化析出
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| 蛋白等電點(diǎn)為7.22,我用的緩沖液是磷酸緩沖液,pH為8.0,500mM的NaCl,500mM的咪唑,鎳柱純化蛋白,蛋白被洗下來(lái)以后,冰上放置,會(huì)隨時(shí)間的增加,析出越多,2個(gè)小時(shí)就有沉淀生成,蛋白濃度在3mg/ml左右,后來(lái)在緩沖液中加了2mM的β-巰基乙醇,一樣析出,離心取上清,我分別用離子濃度為150mM和400mM的透析液透析過(guò)夜,一樣是析出,跪求大佬,這種情況應(yīng)該考慮什么因素?謝謝 |
新蟲(chóng) (初入文壇)
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