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小木蟲論壇-學術科研互動平臺 » 生物醫(yī)藥區(qū) » 生物科學 » 蛋白/酶 » 蛋白質負染答疑
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蛋白質負染答疑
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以下摘自文獻中的一段話“負染技術使用重金屬鹽作為染色劑，比如甲酸鈾或者醋酸雙氧鈾。首先讓重金屬鹽覆蓋并滲透到生物大分子中去，然后把樣品晾干脫水，蛋白質在這個干燥的過程中可能已經分解或者破壞掉了，但干燥后的鹽保持了生物大分子在干燥前的外部輪廓。這個過程有點像鑄造時制作沙模的過程，重金屬鹽就是沙子。當用電鏡觀察時，人們看到的生物大分子的圖像其實是蛋白降解后留下的空洞，因此襯度是反轉的，所以稱為負染。” 照理來說，重金屬的散射能力要比蛋白質本身強很多，那么，沉積在蛋白質表面的重金屬，應該會導致蛋白質本身的散射能力增強，從而使其圖像變得更暗一些，那為什么實際襯度會有所反轉，即圖像變得更亮一些呢？ 還有，覆蓋了重金屬的蛋白質接著干燥脫水，實際干燥只要1-2分鐘即可，在這么短的時間下，蛋白質就會被降解？就算被降解了，蛋白質的外部輪廓被重金屬所替代，不應該是圖像加深么？為什么實際情況會變淺呢？希望蟲友能解開我的疑惑，感謝 |
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