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蛋白質(zhì)負(fù)染答疑
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以下摘自文獻中的一段話“負(fù)染技術(shù)使用重金屬鹽作為染色劑，比如甲酸鈾或者醋酸雙氧鈾。首先讓重金屬鹽覆蓋并滲透到生物大分子中去，然后把樣品晾干脫水，蛋白質(zhì)在這個干燥的過程中可能已經(jīng)分解或者破壞掉了，但干燥后的鹽保持了生物大分子在干燥前的外部輪廓。這個過程有點像鑄造時制作沙模的過程，重金屬鹽就是沙子。當(dāng)用電鏡觀察時，人們看到的生物大分子的圖像其實是蛋白降解后留下的空洞，因此襯度是反轉(zhuǎn)的，所以稱為負(fù)染�！� 照理來說，重金屬的散射能力要比蛋白質(zhì)本身強很多，那么，沉積在蛋白質(zhì)表面的重金屬，應(yīng)該會導(dǎo)致蛋白質(zhì)本身的散射能力增強，從而使其圖像變得更暗一些，那為什么實際襯度會有所反轉(zhuǎn)，即圖像變得更亮一些呢？ 還有，覆蓋了重金屬的蛋白質(zhì)接著干燥脫水，實際干燥只要1-2分鐘即可，在這么短的時間下，蛋白質(zhì)就會被降解？就算被降解了，蛋白質(zhì)的外部輪廓被重金屬所替代，不應(yīng)該是圖像加深么？為什么實際情況會變淺呢？希望蟲友能解開我的疑惑，感謝 |
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