| 5 | 1/1 | 返回列表 |
| 查看: 1595 | 回復: 4 | |||
| 【懸賞金幣】回答本帖問題,作者一粒米飯的飯將贈送您 10 個金幣 | |||
[求助]
Cas12a-crRNA復合體切割熒光報告分子,最后熒光強度很不穩(wěn)定,求助。 已有1人參與
|
|||
|
Cas12a-crRNA復合體切割熒光報告分子,最后體系中的熒光強度也太不穩(wěn)定了,求助是哪里出了問題? 具體過程就是先核算恒溫擴增,然后cas12a-crRNA復合體識別擴增產(chǎn)物并切割熒光報告分子。 操作在冰上進行,已經(jīng)盡量控制每管的擴增時間和切割時間相同了。而且我是把其他試劑先混合后再分裝與靶標核酸孵育反應的。 最后用qPCR儀測熒光,每次差距都特別大。我做了好多次,取其中最接近的三次結(jié)果做了誤差棒,如圖,還是很差。求助這是怎么回事兒啊? 發(fā)自小木蟲IOS客戶端 |
禁蟲 (小有名氣)
|
本帖內(nèi)容被屏蔽 |
專家顧問 (正式寫手)
![]() |
專家經(jīng)驗: +21 |

|
不好意思,我也不知道怎么回事總發(fā)不了圖片 ,但是熒光強度確實像您講的那樣,不高,高濃度的是500左右,低一點的是200左右。那我再嘗試增加擴增時間看看能不能增加一點產(chǎn)物量;蛟S您了解qPCR儀么,我現(xiàn)在有點懷疑是不是我不應該用qPCR儀來檢測這個體系的熒光呀?發(fā)自小木蟲IOS客戶端 |
|
對的,就是恒溫擴增那一步有差別的。因為我在做靈敏度分析,就想看看最低檢測限是多少,但是就結(jié)果很不穩(wěn)定。那我再重復一下高濃度試試看,是我這個體系結(jié)果不穩(wěn)定還是因為靶標濃度低導致信號不穩(wěn)定。感謝您回復。 發(fā)自小木蟲IOS客戶端 |
| 5 | 1/1 | 返回列表 |
| 最具人氣熱帖推薦 [查看全部] | 作者 | 回/看 | 最后發(fā)表 | |
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 材料與化工,291分,求調(diào)劑 +5 | 咕嚕咕嚕123123 2026-03-04 | 5/250 |
|
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 材料專碩290求調(diào)劑 +3 | 杰尼龜aaa 2026-03-04 | 3/150 |
|
|
[考研] 304分材料專碩求調(diào)劑 +8 | qiuzhigril 2026-03-03 | 10/500 |
|
|
[考研] 322,求調(diào)劑 +3 | 菜菜愛玩 2026-03-04 | 3/150 |
|
|
[考研]
材料325求調(diào)劑
30+5
|
mariusuki 2026-03-02 | 10/500 |
|
|
[考研] 264求調(diào)劑 +7 | 26調(diào)劑 2026-03-03 | 7/350 |
|
|
[考研]
|
旅行中的紫葡萄 2026-03-03 | 4/200 |
|
|
[考研] 293求調(diào)劑 +4 | 是樂渝哇 2026-03-03 | 4/200 |
|
|
[基金申請] 沒有青基直接申請面上,感覺自己瘋了 +5 | kevin63t 2026-03-02 | 6/300 |
|
|
[考研]
材料270求調(diào)劑
6+6
|
Eiiiio 2026-03-01 | 11/550 |
|
|
[考研] 材料學碩318求調(diào)劑 +15 | February_Feb 2026-03-01 | 17/850 |
|
|
[考研] 299求調(diào)劑 +5 | kkcoco25 2026-03-02 | 9/450 |
|
|
[考研] 295求調(diào)劑。一志愿報考鄭州大學化學工藝學碩,總分295分 +8 | yl1 2026-03-02 | 9/450 |
|
|
[考研] 085600材料工程一志愿中科大總分312求調(diào)劑 +9 | 吃宵夜1 2026-02-28 | 11/550 |
|
|
[考研] 0856化工專碩求調(diào)劑 +15 | 董boxing 2026-03-01 | 15/750 |
|
|
[考研] 284求調(diào)劑 +10 | 天下熯 2026-02-28 | 11/550 |
|
|
[考研] 322求調(diào)劑 +3 | 熊境喆 2026-03-01 | 3/150 |
|
|
[考研] 279求調(diào)劑 +3 | dua1 2026-03-01 | 4/200 |
|
|
[基金申請]
|
Doma 2026-03-01 | 7/350 |
|
|
[基金申請] 成果系統(tǒng)訪問量大,請一小時后再嘗試。---NSFC啥時候好哦,已經(jīng)兩天這樣了 +4 | NSFC2026我來了 2026-02-28 | 4/200 |
|