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蘿卜和香菜新蟲 (初入文壇)
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[求助]
表達(dá)載體分析 已有1人參與
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各位前輩，我想用同源敲除原理敲除效應(yīng)蛋白，現(xiàn)在買了兩個(gè)真菌表達(dá)載體，不知道多克隆位點(diǎn)在哪里？各位前輩誰用過這兩個(gè)載體或者會(huì)分析的幫我分析一下。不勝感激。 9e882cae5d3115f1640993e2bfe1c80.png d2d4203706af7737c5c8dc553edb62c.jpg |
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【答案】應(yīng)助回帖
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蘿卜和香菜: 金幣+5, ★★★很有幫助 2020-08-25 16:17:09
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pCB1532H-RFP這個(gè)的多克隆位點(diǎn)看上去有兩個(gè)—— 4460~4470這一段，有5個(gè)酶切位點(diǎn)，2個(gè)PCR引物識(shí)別序列，附近還有啟動(dòng)子 716~744這一段，有5個(gè)酶切位點(diǎn)，2個(gè)PCR引物識(shí)別序列，附近也有啟動(dòng)子 pAN7-1這個(gè)質(zhì)粒我沒太看懂 可能是用潮霉素抗性基因（HPH）中間的位點(diǎn)進(jìn)行連接？然后靠抗性篩選來找到陽性克隆嗎？ |
2樓2020-08-25 09:05:29
蘿卜和香菜
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3樓2020-08-25 16:21:19
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4樓2020-08-25 16:27:34
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