 |
 |
 |
 |
 |
 |
||
 |
 |
 |
 |
 |
| 2 | 1/1 | 返回列表 |
| 查看: 1554 | 回復(fù): 1 | |||
absinbio
|
[交流]
IHC、ELISA和WB區(qū)別 已有1人參與
|
|
免疫學(xué)三大工具，IHC、Western blot、ELISA，分別用于定位，定性和定量! IHC（免疫組化） 是融合了免疫學(xué)原理（抗原抗體特異性結(jié)合）和組織學(xué)技術(shù)（組織的取材、固定、包埋、切片、脫蠟、水化等），通過化學(xué)反應(yīng)使標記抗體的顯色劑 (熒光素、酶、金屬離子、同位素)顯色，來對組織（細胞）內(nèi)抗原進行定位、定性及定量的研究(主要是定位)。樣本是細胞或組織，要在顯微鏡下觀察結(jié)果，可能出現(xiàn)膜陽性、質(zhì)陽性和核陽性。 ELISA（酶聯(lián)免疫吸附試驗） 用到了免疫學(xué)原理和化學(xué)反應(yīng)顯色，待測的樣品多是血清、血漿、尿液、細胞或組織培養(yǎng)上清液，因而沒有用到組織包埋、切片等技術(shù)，這是與免疫組化的主要區(qū)別，操作上開始需要將抗原或抗體結(jié)合到固相載體表面，從而使后來形成的抗原-抗體-酶-底物復(fù)合物粘附在載體上，這就是“吸附”的含義。 免疫組化和elisa所用到的原理大致相同，只是因為所檢測的樣品不同，從而在操作方法上有所不同。elisa多用于定量分析，其靈敏度非常高。 Western bolt （蛋白質(zhì)印跡法） 先要進行SDS-PAGE，然后將分離開的蛋白質(zhì)樣品用電轉(zhuǎn)儀轉(zhuǎn)移到固相載體上，而后利用抗原-抗體-標記物顯色來檢測樣品，可以用于定性和半定量。 【1】.對于IHC來說，定位是免疫組化最大的優(yōu)勢 該方法可在組織和細胞中進行抗原的準確定位, 因而可同時對不同抗原在同一組織或細胞中進行定位觀察，這樣就可以進行形態(tài)與功能相結(jié)合的研究，相比于其他蛋白檢測方法，免疫組化具有定位較直接準確、定性靈敏度高，是定位檢測分析首選方法對病理學(xué)領(lǐng)域開展深入研究是十分有意義，尤其對于有些因子的轉(zhuǎn)位研究十分有用。 【2】WB與IHC技術(shù)相比，定量可能更加準確 當(dāng)然WB也可定性和定位(通過提取膜蛋白或核蛋白、胞漿蛋白分別檢測其中抗原含量，進而間接反映它們的定位)，但敏感性遠遠低于IHC。 【3】ELISA與IHC相比，定量最準確，是分泌性蛋白檢測首選方法之一。 尤其對于微定量分析多個樣本非常有用，所用試劑和樣品量很少，結(jié)果精確。IHC針對性比較強，而且一般是以組織或者細胞為樣本，而ELISA一般是使用血清或者組織磨碎液。免疫組化可以快速檢測樣本中抗體的陽性或者陰性，一般不用于定量檢測。 【4】WB和ELISA的區(qū)別 western blotting：可以看到特異性的條帶，但是定量比較煩 ELISA：可以直接讀出濃度，但是如果抗體有非特異性結(jié)合，那得到的數(shù)值就不可信。 WB：只能半定量,但是可以檢測細胞膜蛋白,這點elisa做不到 ELISA：可用定量方法檢測蛋白,也就是說可以觀察不同濃度刺激物對目的蛋白的影響 WB：所檢測的一般是抗原，而elisa抗原抗體都可以檢測。 WB：所檢測的抗原可以知道其分子量的大小，或是否是多聚體、降解產(chǎn)物等，一句話，WB可以確定所用抗體是與哪種蛋白起作用的；而elisa無能為力，一鍋端了。 WB：所適用的一抗一般是線性位點的，elisa線性或構(gòu)象型抗體都可以使用。從另一個意義上講，WB可以做抗體是線性位點還是構(gòu)象型位點的補充判定，而elisa不行。 WB：一次處理量就是一塊膠版，10-20個樣品最多了。elisa一塊96孔板一次可以處理96個樣本，可以設(shè)置多個復(fù)孔、對照、梯度樣等來提高檢測的可信度。 WB：操作常見的非特異性條帶，膜本底差，顯色不好等等缺點在elisa上表現(xiàn)得要好得多。 |
回復(fù)此樓» 猜你喜歡
324求調(diào)劑
已經(jīng)有6人回復(fù)
-
A區(qū)一本交叉課題組，低分調(diào)劑，招收機械電子信息通信等交叉方向
已經(jīng)有28人回復(fù)
-
334求調(diào)劑
已經(jīng)有7人回復(fù)
-
085602高分子方向求調(diào)劑
已經(jīng)有4人回復(fù)
-
083000，總分284，求調(diào)劑
已經(jīng)有3人回復(fù)
-
不限學(xué)校專業(yè)的調(diào)劑同學(xué)看過來
已經(jīng)有7人回復(fù)
-
303求調(diào)劑
已經(jīng)有5人回復(fù)
-
復(fù)試調(diào)劑
已經(jīng)有7人回復(fù)
-
新疆大學(xué)地質(zhì)與礦業(yè)工程學(xué)院招生
已經(jīng)有6人回復(fù)
-
2026年博士名額撿漏
已經(jīng)有4人回復(fù)
» 本主題相關(guān)商家推薦: (我也要在這里推廣)
2樓2020-08-14 08:46:56
相關(guān)版塊跳轉(zhuǎn)
我要訂閱樓主 absinbio 的主題更新
| 2 | 1/1 | 返回列表 |
| 最具人氣熱帖推薦 [查看全部] | 作者 | 回/看 | 最后發(fā)表 | |
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 復(fù)試調(diào)劑 +5 | 呼呼？~+123456 2026-03-05 | 5/250 |
|
|---|---|---|---|---|
|
|
[考研] 接收調(diào)劑 +19 | 津萌津萌 2026-03-02 | 29/1450 |
|
|
[考研] 290求調(diào)劑 +5 | Bananaiy 2026-03-04 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 環(huán)境工程專碩307 一志愿211 四六級已過 求調(diào)劑 +5 | ccc! 2026-03-03 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 281電子信息求調(diào)劑 +5 | jhtfeybgj 2026-03-02 | 9/450 |
|
|
|
[考研] 304求調(diào)劑 +7 | 曼殊2266 2026-02-28 | 8/400 |
|
|
|
[考研] 376求調(diào)劑 +3 | 王浩然sam 2026-03-04 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 320材料與化工，求調(diào)劑 +6 | 鶴遨予卿 2026-03-04 | 8/400 |
|
|
|
[考研] 266求調(diào)劑 +7 | 哇塞王帥 2026-03-03 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 材料專碩346求調(diào)劑 +3 | 旺一下 2026-03-04 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 0703化學(xué)求調(diào)劑 +3 | 將未有期 2026-03-04 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 281求調(diào)劑 +3 | 我是小小蔥蔥 2026-03-03 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 化工專碩調(diào)劑 +4 | 利好利好. 2026-03-03 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 292求調(diào)劑 +3 | sgbl 2026-03-03 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 求調(diào)劑 +4 | Guo_yuxuan 2026-03-02 | 5/250 |
|
|
|
[考研]
 計算機學(xué)碩 分數(shù)285求調(diào)劑
+4
|
glwshine 2026-03-02 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 材料學(xué)碩318求調(diào)劑 +11 | February_Feb 2026-03-01 | 11/550 |
|
|
|
[考研] 【2026 碩士調(diào)劑】課題組 招收調(diào)劑生 +3 | 考研版棒棒 2026-03-02 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 290分材料工程085601求調(diào)劑 數(shù)二英一 +8 | llx0610 2026-03-02 | 9/450 |
|
|
|
[考博] 誠招農(nóng)業(yè)博士 +3 | 心欣向榮 2026-02-28 | 3/150 |
|